Question

【題目】動物細胞培養技術是其他動物細胞工程技術的基礎，請回答下列有關動物細胞培養的問題：

（1）在培養瓶中進行動物細胞培養時，需兩次用到胰蛋白酶，第一次使用的目的是將組織分散成單個細胞，此次的胰蛋白酶也可用__________酶代替。由于動物細胞培養具有__________、__________現象，因此需第二次用該酶處理，然后分瓶培養。在培養過程中，應定期更換培養液，目的是___________________。

（2）目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為__________代以內的細胞，以保持細胞正常的__________核型。

（3）在單克隆抗體制備過程中，將獲得______________________________(答出兩個特點)的雜交瘤細胞進行______培養和抗體檢測以后，再經過多次篩選，可獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞。

Answer 1

【答案】膠原蛋白 貼壁生長（細胞貼壁） 接觸抑制 清除代謝產物，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害 10 二倍體 既能產生特異性抗體，又能無限增殖 克隆化

【解析】

1、動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。
2、單克隆抗體的制備流程：人工誘導經過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再經篩選獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，通過培養獲得的雜交瘤細胞得到單克隆抗體。

（1）胰蛋白酶和膠原蛋白酶都可以將組織分散成單個細胞，所以胰蛋白酶也可用膠原蛋白酶代替。動物細胞培養具有貼壁生長、接觸抑制現象，所以培養過程中還需要用胰蛋白酶處理。在培養過程中，應定期更換培養液，清除代謝產物，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。
（2）目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內的細胞，以保持細胞正常的二倍體核型。
（3）在單克隆抗體制備過程中，將獲得既能產生特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞進行克隆化培養和抗體檢測以后，再經過多次篩選，可獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞。