Question

【題目】溶藻細菌對控制水華有非常重要的作用。研究人員從池塘中采集水樣，加人到無菌錐形瓶中，用搖床在37℃下振蕩培養20 min，使其均勻分散成菌懸液，再通過分離、純化、鑒定得到了溶藻細菌。請回答下列問題：

（1）分離前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL，進行梯度稀釋，其目的是___________。再取每個稀釋度的菌懸液0.1mL用___________法接種到細菌固體培養基上，每個梯度做三組，37℃恒溫培養箱中培養，直至長出菌落。

（2）若將1mL菌懸液梯度稀釋106倍，再取0.1mL接種到細菌固體培養基上，分別形成了260、280、270個菌落，則原菌懸液中每毫升有細菌___________個，該方法所得測量值一般比實際值偏___________，原因是_________________________________。

（3）水華為藍藻暴發所致。研究人員嘗試利用溶藻細菌限制藍藻數量，相關實驗如圖所示（圖中①⑥表 示實驗步驟）。

如果在步驟⑤實驗組的每個培養皿中做三個重復實驗，可采取的做法是：_______________。為完善實驗設計方案，應增設對照組，可采取的做法是：_________________________________。藍藻通常呈藍綠色，觀察實驗結果，發現培養皿中出現褪色空斑，說明藍藻_________________________________。

Answer 1

【答案】使水樣中的各種微生物細胞分散開來稀釋涂布平板2.7×109 低當兩個或多個細胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落在每個培養皿中，選擇三個不同位置，各滴加等量菌液在對照組的每個培養皿中，選擇三個不同位置，各滴加等量的、不含溶藻細菌的細菌培養液被溶藻細菌裂解（死亡）

【解析】

由題文描述可知：該題綜合考查學生對微生物的實驗室培養、微生物的分離與計數等相關基礎知識的識記和理解能力，以及能對一些簡單的實驗方案做出恰當的評價和修訂能力。

(1)為了使水樣中的各種微生物細胞分散開來，分離前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL，進行梯度稀釋。然后采用稀釋涂布平板法，將其接種到細菌固體培養基上。

(2)若將1mL菌懸液梯度稀釋106倍，再取0.1mL接種到細菌固體培養基上，分別形成了260、280、270個菌落，則原菌懸液中每毫升有細菌的個數＝（260＋280＋270）÷3÷0.1×106＝2.7×109個。由于當兩個或多個細胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落，所以該方法所得測量值一般比實際值偏低。

(3) 本實驗的目的是探究溶藻細菌對藍藻數量的影響，自變量是溶藻細菌的有無。依據實驗設計遵循的對照原則、等量原則、重復原則并結合題意“在每個培養皿中做三個重復實驗”可知，為了能夠達到實驗目的，實驗組的設置是在每個培養皿中，選擇三個不同位置、各滴加等量菌液，而對照組的設置則是在每個培養皿中，選擇三個不同位置，各滴加等量的、不含溶藻細菌的細菌培養液。由圖示信息可知：先單獨光照培養藍藻，在培養皿中先形成藍綠色菌斑；后加入溶藻細菌培養液。由于溶藻細菌可將藍綠色菌斑里的藍藻分解，導致藍藻裂解死亡，所以最終使藍綠色菌斑褪色成為空斑。可見，如果培養皿中出現褪色空斑，說明藍藻被溶藻細菌裂解死亡。