Question

【題目】下圖是某課題小組設計的“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”的實驗流程示意圖。回答下列問題。

(1)微生物接種的方法有很多，該圖所示為____法，這一方法常用來統計樣品中____________（填“活菌”、“死菌”或“活菌和死菌”）的數目。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在 ___的平板進行計數。實驗統計的菌落數往往比細菌的實際數目低， 這是因為____。

(2)實驗過程中，需對培養基進行滅菌，常用的方法是____。接種操作都應在火焰附近進行，目的是防止____。

(3)對分離得到的分解尿素的細菌作進一步鑒定時，可在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑進行細菌培養。其鑒定原理是____。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板 活菌 30—300 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 高壓蒸汽滅菌 雜菌污染 分解尿素的細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，指示劑變紅

【解析】

稀釋涂布平板法常用來統計樣品中活菌的數目。當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數。

(l)微生物接種的方法有很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，該圖所示為稀釋涂布平板法，這一方法常用來統計樣品中活菌的數目。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30—300的平板進行計數。實驗統計的菌落數往往比細菌的實際數目低， 這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

(2)常見的滅菌方法有：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，實驗過程中，需對培養基進行滅菌，常用的方法是高壓蒸汽滅菌。接種操作都應在火焰附近進行，酒精燈火焰附近存在無菌區域，目的是防止雜菌污染。

(3)在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱做選擇培養基。對分離得到的分解尿素的細菌作進一步鑒定時，可在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑進行細菌培養。其鑒定原理是分解尿素的細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，指示劑變紅。