Question

【題目】淀粉酶在工業生產上應用最早，迄今仍是用途最廣、產量最大的酶制劑產品之一。為了提高淀粉酶的生產水平，首先要從土壤中篩選出產淀粉酶的活性菌株。某研究人員對所取土樣進行產淀粉酶的細菌的分離操作(A組)和計數操作(B組)，過程如圖Ⅰ。請回答下列問題：

(1)步驟①取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要___(填操作)，步驟④所用培養基的碳源是___；步驟⑤所用固體培養基的制備步驟是計算→____→溶化→滅菌→倒平板；步驟⑤⑧接種時需設置未接種培養基做對照，目的是_______。

(2)步驟⑥挑選出的菌落若要頻繁使用，可以采用臨時保藏的方法，該方法的缺點是________。

(3)步驟⑦中，將1mL菌液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度經過步驟⑧各在3個平板上接種(每個平板的接種量為0.1mL)，經適當培養后，2組平板上的菌落數分別為59、57、58和2、7、5。據此可得出每升菌液中的活菌數為____個。

(4)圖Ⅱ所用的接種方法____(填“能”或“不能”)對活菌進行計數；甲、乙、丙為劃線的三個區域，為正確完成整個接種過程，接種環至少進行____次灼燒滅菌。

Answer 1

【答案】滅菌 淀粉 稱量 檢測培養基是否被污染 保存時間不長，菌種容易被污染或產生變異 5.8×106 不能 4

【解析】

取樣用的金屬用具可采用干熱滅菌法進行滅菌，防止雜菌污染；固體培養基的制備步驟是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；對活菌進行計數常用稀釋涂布法。

(1) 步驟①取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封等使用工具在使用前都需要滅菌；步驟④所用培養基是選擇培養基，用淀粉為唯一碳源；步驟⑤所用固體培養基的制備步驟是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；步驟⑤⑧接種時需設置未接種培養基做對照，目的是檢測培養基是否被污染。

(2)步驟⑥挑選出的菌落若要頻繁使用，可以采用臨時保藏的方法，但該方法存在保存時間不長，菌種容易被污染或產生變異的缺點。

（3）步驟⑦的稀釋液為100倍時形成的菌落平均數為58，在30~300之間，適于進行分離、計數。據此可得出每升菌液中的活菌數為5.8×106個。

（4）圖Ⅱ所用的接種方法為平板劃線法，常用稀釋涂布法對活菌進行計數。甲、乙、丙為劃線的三個區域，為正確完成整個接種過程，接種環至少進行4次灼燒滅菌。