Question

【題目】應用現代生物技術可以大量獲得針對甲型H1N1病毒的抗體，并可用于臨床治療，如圖表示制備該抗體的設想，請據圖回答下列問題：

(1)在培育轉入甲型H1N1病毒抗體基因的牛的過程中，①過程需要的工具酶是__________________________________________，②過程常用的方法是______________。

(2)轉入甲型H1N1病毒抗體基因的牛可通過分泌乳汁來生產甲型H1N1病毒抗體，在基因表達中，甲型H1N1病毒抗體基因的首端必須含有__________，它是________________識別和結合的位點。③過程培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可以采用____________技術，培養(yǎng)出多頭相同的轉基因牛。

(3)prG能激發(fā)細胞不斷分裂，通過基因工程導入該調控基因可制備單克隆抗體，Ⅰ最可能是__________細胞，Ⅱ代表的細胞具有____________________________的特點。

(4)制備單克隆抗體也可以用動物細胞融合技術，與動物細胞融合過程不同，植物體細胞雜交在細胞融合之前要用______________________對細胞進行處理，作用是除去______________。

Answer 1

【答案】 限制酶、DNA連接酶 顯微注射法 啟動子 RNA聚合酶 胚胎分割 漿 既能在體外大量增殖，又能產生專一抗體 纖維素酶、果膠酶 細胞壁

【解析】試題分析：題圖中①是基因工程中基因表達載體的構建過程，②是將目的基因（甲型H1N1病毒抗體基因）導入受精卵，③是是胚胎移植過程。Ⅰ是導入了目的基因（prG）的受體細胞，Ⅱ是篩選既能無限增殖又能產生特定抗體的轉基因克隆細胞。

（1）由以上分析可知：①是基因工程中基因表達載體的構建過程，需要先用限制酶切割目的基因和運載體，后用DNA連接酶連接成重組DNA。將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法。

（2）基因表達載體包括啟動子、目的基因、標記基因和終止子等，所以在甲型H1N5病毒抗體基因的首端必須含有啟動子。它是RNA聚合酶識別和結合的位點，③是胚胎移植過程，移植前需將受精卵培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚時期再植入母體。因為來自同一胚胎的后代具有相同的基因型，所以要培養(yǎng)出多頭相同的轉基因奶牛，可以采用胚胎分割技術。

（3）只有漿細胞能分泌抗體，因此Ⅰ最可能是漿細胞(效應B細胞)細胞。導入prG后漿細胞才具備無限增殖的能力，因此篩選出的Ⅱ細胞既能無限增殖又能產生特定抗體。

（4）植物體細胞雜交在細胞融合之前要用酶解法去細胞壁，即用纖維素酶和果膠酶對細胞進行處理，以除去細胞壁。