Question

【題目】科研人員采用轉基因體細胞克隆技術獲得轉基因牛，以便通過乳腺生物反應器生產人凝血因子IX醫用蛋白，其技術路線如圖。

（1） 由過程①獲得的A為________________________。過程②③④分別采用的是胚胎工程中的___________技術、______________技術、_______________技術。

（2）圖中去掉卵母細胞的核，目的是________________________。受體應選用____________期卵母細胞。

（3） 體細胞進行體外培養時，所需氣體主要有O2和CO2，其中CO2的作用是____________。

（4）進行胚胎移植時，代孕母牛對移入子宮的重組胚胎基本上不發生__________________，這為重組胚胎在代孕母牛體內的存活提供了可能。為了提高已有胚胎的利用率，可采用____________________技術。

（5）采用胎兒成纖維細胞進行轉基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉基因牛，這是因為__________________________________。

Answer 1

【答案】含目的基因的表達載體 （體細胞）核移植 細胞培養 （早期）胚胎移植 保證核遺傳物質來自含目的基因的成纖維細胞 MⅡ 維持培養液（基）的pH（或：酸堿度） 免疫排斥反應 胚胎分割 成纖維細胞可進行傳代培養

【解析】

胚胎移植的生理基礎

（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環境；

（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態，這就為胚胎的收集提供了可能；

（3）子宮不對外來胚胎發生免疫排斥反應，這為胚胎在受體內的存活提供了可能；

（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。

（1）要想目的基因只在乳腺組織中表達，在構建基因表達載體時，需要將人的血清白蛋白基因和乳腺組織特異性表達的啟動子等調控組建重組在一起，過程①獲得的A為含目的基因的表達載體，A常用顯微注射法導入受體細胞。過程②③④分別采用的技術手段為（體細胞）核移植、（動物）細胞培養和胚胎移植技術。

（2）在核移植之前，必須先去掉受體卵細胞的核，目的是保證核遺傳物質來自含目的基因的成纖維細胞，核移植的受體應選用處于MⅡ中期的卵母細胞。

（3）體細胞進行體外培養時，所需氣體主要有O2和CO2，其中氧氣是細胞代謝所必需的，而CO2的作用是維持培養液的pH。

（4）進行胚胎移植時，代孕母牛對移入子宮的重組胚胎基本上不發生免疫排斥反應，這為重組胚胎在代孕母羊體內的存活提供了可能。通常可采用胚胎分割技術提高已有胚胎的利用率。

（5）因為整合有目的基因的成纖維細胞可進行傳代培養，所以采用胎兒成纖維進行轉基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉基因綿羊。