Question

【題目】硒是一種化學元素，可用作光敏材料、電解錳行業催化劑動物體必需的營養元素和植物有益的營養元素等。硒在地殼中的含量很低，通常極難形成工業富集。亞硒酸鈉對細菌的生長有明顯的毒害作用，土壤中的一些富硒細菌可將其還原為紅色單質硒，除工業上生產硒的方法之外，利用這種方法也可以得到少量的硒及分解亞硒酸鈉的細菌。如圖為土壤中富硒細菌的篩選和純化過程。請回答下列問題。

（1）應選擇____________的土壤樣品接種到含亞硒酸鈉的液體培養基中進行培養，若②中出現____________的現象，則說明培養基中的亞硒酸鈉被細菌還原。

（2）④采用的接種方法為____________法，使用該方法能得到單一菌落的原理是___________。

（3）固定化富硒菌一般采用____________法，不采用另外兩種方法的原因是____________。

（4）研究人員篩選出一種具有較強富硒能力的菌株，現欲通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值，請將下列實驗補充完整；

①配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉____________（填“液體”或“固體”）培養基；

②向培養基中分別接種____________的該菌株菌液，在適宜條件下培養一段時間；

③觀察菌落生長情況，____________的培養基對應的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株的最高耐受值。

Answer 1

【答案】富含亞硒酸鈉 培養基變紅（紅色） 稀釋涂布平板 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落 包埋 細菌細胞分子較大，難以吸附和結合，通常采用包埋法 固體 等量 有菌落生長（有菌落生長且數目最少）

【解析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）應選擇富含亞硒酸鈉的土壤樣品接種到含亞硒酸鈉的液體培養基中進行培養。由“富硒細菌可將其還原為紅色單質硒”可知，若②中出現培養基變紅的現象，則說明培養基中的亞硒酸鈉被細菌還原。

（2）由圖可知，④采用的接種方法為稀釋涂布平板法，使用該方法能得到單一菌落的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。

（3）固定化方法包括包埋法、化學結合法、物理吸附法，固定化富硒菌一般采用包埋法，不采用另外兩種方法的原因是細菌細胞分子較大，難以吸附和結合，通常采用包埋法。

（4）①通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值，配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉固體培養基；

②實驗設計應注意等量原則，故向培養基中分別接種等量的該菌株菌液，在適宜條件下培養一段時間；

③亞硒酸鈉對細菌的生長有明顯的毒害作用，由題意可知，有菌落生長且數目最少的培養基對應的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株的最高耐受值。