Question

【題目】土壤中含有能將難溶性磷酸鹽轉變成植物可以吸收利用的可溶性磷的優良解磷菌株Q。下圖1表示制備固體培養基過程中的某操作，圖2是科研人員從土壤中分離出菌株Q的部分過程示意圖。

請回答下列問題：

（1）圖1所示操作稱為_________，待平板冷凝后_________，以防止________。

（2）圖2所示接種方法是________。在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經適當培養后，3個平板上菌落數分別是38、42、40，則1g土壤中的活菌數約為________個。

（3）圖3是某同學利用不同于圖2方法分離菌株Q的示意圖。下列對其操作及結果的敘述錯誤的有________。

a．操作前用無水乙醇對雙手進行消毒處理 b．劃線時將沾有菌種的接種環插入培養基

c．只有在⑤區域中才能得到所需菌落 d．整個過程需要對接種環進行6次灼燒

（4）固體培養基中難溶性磷酸鹽在菌株Q的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（圖4），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解難溶磷酸鹽的能力大小。下表是初步篩選出的三種優良解磷菌株。

菌株	透明圈直徑（D）	菌落直徑（d）
M-3-01	18.8	12.3
B3-5-6	20.7	8.0
T-4-01	9.1	6.5

根據實驗結果分析溶解難溶性磷酸鹽能力最強的菌株是________。該菌種分離純化后，常用________法進行長期保存。

Answer 1

【答案】倒平板 倒置 皿蓋上的冷凝水落入培養基 稀釋涂布平板法 a、b、c B3-5-6 甘油管藏

【解析】

分析題意可知，“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小”，結合表格可知，菌株B3-5-6的比值（D/d）最大，說明菌株B3-5-6的溶解磷的能力最大。

（1）圖1所示操作稱為倒平板，待平板冷凝后倒置，以防止皿蓋上的冷凝水落入培養基，帶來污染。

（2）圖2所示接種方法是稀釋涂布平板法。取1g土壤，按如圖稀釋后，在三個平板上分別接入0.1ml稀釋液后，經適當培養后，3個平板上的菌落數分別是38、42、40，據此可計算出每克土樣中的活菌數為（38+42+40）/3×10×10×10×（1/0.1）×100=4.0×107個。

（3）圖3是通過平板劃線接種操作。

a、操作前用70%的酒精溶液對接種人員的雙手進行消毒處理，不能進行滅菌處理，a錯誤；
b、劃線操作時將沾有菌種的接種環涂抹在培養基表面，b錯誤；
c、在5個區域中，只要有單個活細菌，通過培養即可獲得所需菌落，c錯誤；
d、在每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，接種環的滅菌方法應是在火焰上灼燒，整個過程需要對接種環進行6次灼燒，d正確。
故選abc。

（4）根據實驗原理中“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小”，結合表格數據可以確定解磷能力最強的菌株是 B3-5-6。該菌種分離純化后，常用甘油管藏法進行長期保存。