Question

【題目】我國肝損傷病的發(fā)生率較高，據(jù)研究，不同濃度的胰島素對減緩肝

細胞損傷有保護作用，且胰島素濃度越高保護作用越強：LPS是一種導(dǎo)致肝損傷的常見物質(zhì)（用生理鹽水配制）。現(xiàn)欲以大鼠為材料驗證上述結(jié)論，回答下列問題：

（1）材料制備：

①肝細胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用______酶消化，經(jīng)多次洗滌離心處理得到分散的肝細胞，加入適宜的細胞培養(yǎng)液置于卡氏瓶和CO2培養(yǎng)箱中進行______培養(yǎng)，將培養(yǎng)得到的肝細胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再______，置于相同且適宜的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)備用。

②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細胞懸液中。

（2）實驗方案及結(jié)果預(yù)期：

①A組作為空白對照組，則往B、C、D、E組還需加入等量的______。

②若本實驗的結(jié)果用細胞存活率作為檢測指標，各組的存活細胞數(shù)先用______測出OD值，然后計算各組的細胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細胞死亡對OD值的影響。

③用柱形圖表示各組的實驗結(jié)果。______

（3）實驗從細胞水平分析推測胰島素對減緩肝細胞損傷的機理可能有______（至少寫出二點）。

Answer 1

【答案】胰蛋白 原代 設(shè)置多個重復(fù)樣液 LPS 比色計 延緩細胞分裂、延緩細胞凋亡

【解析】

根據(jù)題意，該實驗的實驗?zāi)康臑轵炞C不同濃度的胰島素對減緩肝細胞損傷有保護作用，且胰島素濃度越高保護作用越強。實驗自變量為不同濃度的胰島素，因變量為細胞損傷程度，可以用細胞的存活率來表示；為了使實驗更具有科學性，需要設(shè)置空白對照組和經(jīng)作用后的對照組。

根據(jù)實驗?zāi)康摹�實驗設(shè)計原則和實驗的部分步驟，依據(jù)動物細胞培養(yǎng)的過程，可進行如下操作：

（1）材料制備：

①肝細胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用胰蛋白酶消化，經(jīng)多次洗滌離心處理得到分散的肝細胞，加入適宜的細胞培養(yǎng)液置于卡氏瓶和CO2培養(yǎng)箱中進行原代培養(yǎng)，將培養(yǎng)得到的肝細胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再設(shè)置多個重復(fù)樣液，置于相同且適宜的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)備用。

②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細胞懸液中。

（2）實驗方案及結(jié)果預(yù)期：

①A組作為空白對照組，則往B、C、D、E組還需加入等量的LPS。

②若本實驗的結(jié)果用細胞存活率作為檢測指標，各組的存活細胞數(shù)先用比色計測出OD值，然后計算各組的細胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細胞死亡對OD值的影響。

③實驗結(jié)果應(yīng)為：胰島素濃度越高，細胞存活率越大，故用柱形圖表示各組的實驗結(jié)果：

（3）實驗從細胞水平分析推測胰島素對減緩肝細胞損傷的機理可能有延緩細胞分裂、延緩細胞凋亡等。