Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題:

(一) 植物在突然遭遇寒冷環(huán)境時，體內(nèi)脂氨酸的含量會增加，以度過寒冷的不良環(huán)境。因此冷害處理后的植物體內(nèi)脂氨酸含量可以作為不同植物品種抗冷害性能的生理指標。農(nóng)業(yè)部門的科學(xué)研究者為了找到一種抗寒能力較強的水稻，對多個水稻品種進行了冷害處理，測定體內(nèi)的脂氨酸含量并進行比較，從而選擇出合適的品種。

(1)脂氨酸的含量可以通過讓其與相應(yīng)試劑反應(yīng)并顯色后，用 __________（填儀器名稱）測定其OD值來測定。測定OD值前，需要通過預(yù)實驗確定所需比色杯的_________，脂氨酸的含量相同時，比色杯的該指標越大所測得的OD值越_______。可以通過OD值來確定脂氨酸含量的原理是_____________________。

(2)為了便于測定不同品種的水稻冷害處理后的脂氨酸含量，農(nóng)業(yè)部門的科學(xué)研究者首先要將已知含量梯度的脂氨酸顯色反應(yīng)后測定其OD值，繪制好___________。

(3)后來發(fā)現(xiàn)該品種水稻在寒冷環(huán)境中種植容易得一種怪病，科學(xué)研究者猜想是感染了某種抗寒能力比較強的細菌，為了篩選出這種細菌，需要配制______(A.LB選擇培養(yǎng)基 B.MS選擇培養(yǎng)基 C.LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基 D.MS全營養(yǎng)培養(yǎng)基)，并需將接種后的培養(yǎng)基置于溫度設(shè)置為________(低溫\中溫\高溫)的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，然后對菌落中的細菌進行研究。

(二)科學(xué)家通過誘導(dǎo)黑鼠體細胞去分化獲得誘導(dǎo)性多功能干細胞(iPS)，繼而利用iPS細胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠。流程如下:

(1)要獲取iPS細胞，首先要進行黑鼠體細胞體外培養(yǎng)。為了方便實驗開展，可以對黑鼠組織用胰蛋白酶處理，其目的是消化____________，以獲得單個細胞的懸浮液。然后通過_____________得到純系的細胞群。

(2)對從灰鼠的____________部位獲取的2-細胞胚胎，進行體外培養(yǎng)至囊胚后，將其制成重組囊胚。重組囊胚移植到白鼠體內(nèi)后其___________部分會發(fā)育形成胚胎的附屬結(jié)構(gòu)或胚外結(jié)構(gòu)，而________分化出成體動物的所有組織和器官。

(3)制備iPS細胞的方法是把0ct4等轉(zhuǎn)錄因子在基因?qū)�入小鼠成纖維細胞，有道其發(fā)生轉(zhuǎn)化，從而產(chǎn)生iPS細胞。在基因?qū)�入過程中，除了質(zhì)粒外，還可以選用_____________為運載體。若將某目的基因?qū)�入的受體細胞為大腸桿菌時___(能/不能)選用T2噬菌體為運載體。

Answer 1

【答案】分光光度計/光電比色計/比色計 規(guī)格 越大 脂氨酸含量越高，顯色后顏色越深，OD值越大，呈正比例關(guān)系 標準曲線 C 低溫 組織中的膠原纖維(或再加上“細胞外的其他成分”) 克隆培養(yǎng)法 輸卵管(或子宮角) 滋養(yǎng)層 導(dǎo)入的iPS細胞群 病毒 不能

【解析】

1、LB培養(yǎng)基是通用的細菌培養(yǎng)基，MS培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基。

2、載體需具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切點；③具有標記基因。

(1)脂氨酸與相應(yīng)試劑可發(fā)生顯色反應(yīng)，可利用分光光度法測定其含量，用分光光度計測定其OD值來測定。測定OD值前，需要通過預(yù)實驗確定所需比色杯的規(guī)格。脂氨酸的含量相同時，比色杯的規(guī)格越大，所測得的OD值越大。一定范圍內(nèi)，脂氨酸的含量越高，與相應(yīng)試劑發(fā)生顯色反應(yīng)后顏色越深，測定的OD值就越大，即脂氨酸含量與OD值成正比例關(guān)系。因此，可以通過OD值來確定脂氨酸含量。

(2)為了便于測定不同品種的水稻冷害處理后的脂氨酸含量，農(nóng)業(yè)部門的科學(xué)研究者首先要將已知含量梯度的脂氨酸顯色反應(yīng)后測定其OD值，繪制好標準曲線。

(3)后來發(fā)現(xiàn)該品種水稻在寒冷環(huán)境中種植容易得一種怪病，科學(xué)研究者猜想是感染了某種抗寒能力比較強的細菌，為了篩選出這種細菌，需要配制LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基，并需將接種后的培養(yǎng)基置于溫度設(shè)置為低溫的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，然后對菌落中的細菌進行研究。

(二)(1)先用胰蛋白酶處理黑鼠組織，消化組織中的膠原纖維，以獲得單個細胞的懸浮液。然后通過克隆培養(yǎng)法得到純系的細胞群。

(2)由題圖可知，可從灰鼠的輸卵管中或子宮角直接獲取2-細胞胚胎，再進行體外培養(yǎng)至囊胚后，將其制成重組囊胚。重組囊胚移植到白鼠體內(nèi)后其滋養(yǎng)層部分會發(fā)育形成胚胎的附屬結(jié)構(gòu)或胚外結(jié)構(gòu)，而內(nèi)細胞團（即導(dǎo)入的iPS細胞群）分化出成體動物的所有組織和器官。

(3)基因工程中，在基因?qū)�入過程中，除了質(zhì)粒外，還可以選用病毒（動物病毒、植物病毒和λ噬菌體）為運載體。T2噬菌體無法在大腸桿菌內(nèi)穩(wěn)定保存，因此將目的基因?qū)�入的受體細胞為大腸桿菌時不能選用T2噬菌體為運載體。