Question

【題目】大量的科學研究已經證明，VP40蛋白基因的基因突變或者VP40蛋白的缺失會終止埃博拉病毒的侵染行為，因此制備針對VP40蛋白的抗體可能是戰勝埃博拉病毒的新途徑。請據圖回答：

（1）過程①中選用兩種限制酶切割，使目的基因的兩端獲得不同的黏性末端，這樣處理的目的是_______。

（2）圖中過程②需要用_________處理大腸桿菌。在基因表達載體中，VP40蛋白基因的首端必須含有______，其作用是能夠被__________識別和結合，從而保證③順利完成。

（3）為檢測VP40基因是否成功表達，可以采用________技術。VP40蛋白抗體能夠戰勝埃博拉病毒的原因是____________________。

Answer 1

【答案】 防止目的基因環化（防止目的基因與質粒錯誤連接） Ca2+ （CaCl2） 啟動子 RNA聚合酶 抗原-抗體雜交 VP40蛋白抗體與VP40蛋白結合，阻止了埃博拉病毒侵染細胞

【解析】試題分析：據圖分析，①表示構建基因表達載體，②表示將重組質粒導入大腸桿菌，③表示大腸桿菌產生VP40蛋白（作為抗原）；④誘導細胞融合，產生雜交瘤細胞。

（1）過程①中選用兩種限制酶切割目的基因和質粒，可以使得目的基因和質粒都露出兩種不同的粘性末端，可以防止目的基因環化、目的基因與質粒錯誤連接等。

（2）②表示將重組質粒導入大腸桿菌，需要用鈣離子處理大腸桿菌，使得大腸桿菌成為感受態細胞；基因表達載體中，目的基因的首端必須含有啟動子，是RNA聚合酶的識別位點，啟動轉錄過程。

（3）VP40基因成功表達的產物是VP40蛋白，可以用抗原-抗體雜交進行檢測；VP40蛋白抗體與VP40蛋白結合，阻止了埃博拉病毒侵染細胞。