Question

【題目】下圖表示利用經抗原免疫后的B淋巴細胞與小鼠的骨髓瘤細胞進行雜交，制備單克隆抗體的過程。請據圖回答下列問題：

（1）在單克隆抗體的制備過程中，應用了細胞工程中的______和_____兩大技術。

（2）將特定的抗原注入小鼠，需在一定時間內間隔注射3次，其目的是______。

（3）培養雜交瘤細胞的培養基中需加入動物血清，原因是__________________；提供氣體條件CO2的作用是______；雜交瘤細胞體外培養過程中，為避免細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害，常采取的措施是_______________。

（4）對篩選出來的雜交瘤細胞應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個細胞/mL，每孔加入細胞稀釋液_________mL（填“0．1”“1”或“10”），使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的。

（5）單克隆抗體注入體內后可以自動追蹤抗原（如癌變細胞等）并與之結合，而不攻擊正常細胞，故可制成“生物導彈”，這是利用了_________________________的原理，與傳統從血清提取的抗體相比，單克隆抗體的優點是_______________。

Answer 1

【答案】動物細胞培養 動物細胞融合 加強免疫，刺激小鼠機體產生更多的淋巴細胞 補充細胞生長所需的未知營養物質 維持培養液的pH 定期更新培養液 0.1 抗原與抗體高特異性結合的特性 特異性強、靈敏度高、可大量制備等

【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體；誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）；單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞(去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞)；②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性。

（1）單克隆抗體制備的過程中運用的細胞工程技術有動物細胞培養和動物細胞融合技術。

（2）在一定時間內間隔注射3次抗原，其目的是加強免疫，刺激小鼠機體產生更多的淋巴細胞。

（3）對雜交瘤細胞進行培養時，需要加入動物血清，以補充細胞生長所需的未知營養物質；培養液中二氧化碳的作用是維持培養液的pH；培養過程中，為了避免細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害，需要定期更新培養液。

（4）已知稀釋后密度是3～10個細胞/mL，要使每個孔內不多于一個細胞，則每孔應該加入細胞稀釋液0.1mL。

（5）由于抗體能夠與抗原特異性結合，因此將單克隆抗體制成“生物導彈”，可以保證將藥物定向帶到癌變部位，而不攻擊正常細胞；單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、化學性質單一、可大量制備等優點。