Question

【題目】某研究性學習小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發酵中產生乳酸，還可以降解亞硝酸鹽，該小組利用泡菜液進行了相關的研究。請回答下列問題：

（1）乳酸菌和酵母菌在結構上的主要區別是乳酸菌____________________________。

（2）測定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用_________法。食物中的亞硝酸鹽絕大部分隨人體尿液排出，其余的在特定條件下可以轉變為致癌物______________。

（3）小組成員用改良的MRS固體培養基分離乳酸菌，該培養基成分如下：

蛋白胨	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖	CaCO3	瓊脂	蒸餾水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000ml

①該培養基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產生的乳酸能溶解培養基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養基屬于______（填選擇或鑒別）培養基。

②小組成員在分離純化乳酸菌時，用______將泡菜液進行梯度稀釋后，取0．1ml加入到50℃左右的培養基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層透明的固體培養基。 加蓋一層透明的固體培養基的目的是_____________________________________________。

③在恒溫培養箱中培養72h后，挑取溶鈣圈較大的菌落，用平板劃線法進行進一步純化。若圖甲是接種培養后的菌落分布圖，對應的平板劃線操作示意圖為___________。

④乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的___________。

Answer 1

【答案】無以核膜為界限的細胞核 比色 亞硝胺 鑒別 無菌水 隔絕空氣（氧氣），確保無氧環境 丙 甘油

【解析】

（1）運用平板劃線法接種微生物時，在進行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落；

（2）培養基的分類：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養基	培養基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養基可以鑒別大腸桿菌

（1）乳酸菌屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，原核細胞和真核細胞在結構上的主要區別是原核細胞無以核膜為界限細胞核；
（2）測定泡菜中亞硝酸鹽的含量時，要將顯色后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行比色，該方法叫比色法；食物中的亞硝酸鹽絕大部分隨人體尿液排出，其余的在特定條件下可以轉亞硝胺，亞硝胺是致癌物；

（3）①鑒別培養基是依據微生物產生的某種代謝產物與培養基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計的，故題干中的培養基類型屬于鑒別培養基；

②為避免雜菌混入，進行梯度稀釋應用無菌水操作；因乳酸菌為厭氧生物，故加蓋一層固體培養基的目的是隔絕空氣（氧氣），確保無氧環境；

③使用平板劃線法時，在進行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線，畫3-5道直線，且最后一個區域不能與第一區域相連，如圖丙所示；

④長期保存菌種應該用甘油管藏法，因此乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的甘油。