Question

【題目】為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數量及其對抗生素耐藥性情況”某同學進行了如下實驗:

請分析回答下列問題：

（1）配制的細菌培養基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養成分外，還應加入適量的__________和瓊脂。在培養基各成分溶化與滅菌之間，要進行的操作是_________。

（2）接種微生物的方法有很多，圖中過程①②③所示的方法為_______________。用該方法統計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養皿，原因是________________。用該方法統計樣本菌落數后，所得數據需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數量（單位：個/ml)，這里的n=_____________。

（3）請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環素耐藥性”的實驗操作步驟：

步驟1:分別取______________加入三組無菌培養皿中，滅菌并冷卻到__________℃左右的培養基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2:向三組培養基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。

步驟3:將接種后的三組培養基和一個_________都置于適宜溫度等條件下培養一定時間，觀察比較培養基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】維生素調pH稀釋涂布平板法分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠6等量的且適量的青霉素、四環素、無菌水50未接種的培養基

【解析】

微生物的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。微生物的純化方法有平板劃線法與稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布法還可以用于活菌計數。分析圖解可知，圖示過程為微生物分離與純化過程中的稀釋涂布平板法，即將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）配制的細菌培養基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養成分外，還應加入適量的微生素和瓊脂。在培養基各成分溶化與滅菌之間，要先調pH。

（2）接種微生物的方法有很多,其中主要有平板劃線法與稀釋涂布平板法，圖中過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養皿，分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠。用該方法統計樣本菌落數后，所得數據需要乘以10n后才可表示乳酸菌的數量（單位：個/mL）。分析圖解可知，圖中酸奶樣品總共稀釋105倍，并且稀釋涂布平板時只取了0.1ml，因此這里的n=6。

（3）步驟1：根據實驗目的可知該實驗的自變量是青霉素、四環素的有無，結合實驗設計的等量原則，應該分別取等量的青霉素、四環素和無菌水加入三組無菌培養皿中。滅菌并冷卻到50℃左右的培養基，立即混勻，靜置凝固成平板。步驟3：根據對照原則，且為了檢測培養基滅菌是否合格，應該將接種后的三組培養基和一個未接種的培養基都置于適宜溫度等條件下培養培養一定時間，觀察比較培養基中菌落生長情況。