Question

【題目】農業生產上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤。為修復被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明。請分析回答：

(1)微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作技術，該技術的核心是_______。

(2) 在選育過程中，應將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一______的培養基上。通過比較單菌落周圍__________的大小，可篩選出高效的目的菌。實驗結果如右圖顯示的A～E五種菌株中，_______是最理想菌株。

(3) 若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可采用的接種方法是_______。將lmL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.lmL稀釋液，經過適當培養后，6個平板上的菌落數分別為59、57、58和2、7、5，空白對照組的平板上沒有菌落，則每升土壤溶液中活菌數的理論值為_____________個。實際上每升土壤溶液中的活菌數比通過統計所得的這一數值要大，因為______________________。

Answer 1

【答案】無菌操作 氮源 透明圈 E 稀釋涂布平板法 5.8106 當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

1、選擇培養基：培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長。分析題意可知，“該除草劑（含氮有機物）在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明”，說明培養基中是以除草劑為唯一氮源，并且降解后培養基出現透明圈。

2、每ml樣品中的菌落數＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)M代表稀釋的倍數。

（1）微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作技術，該技術的核心是防止雜菌污染（無菌操作）。

（2）該除草劑為含氮有機物，為了選育能降解該除草劑的細菌，應將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養基上。通過比較單菌落周圍透明圈的大小，可篩選出高效的目的菌。E透明圈最大，降解除草劑的效果最好，故是最理想菌株。

（3）若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可采用稀釋涂布平板法。微生物計數時需要選擇菌落數在30300的進行記數，因此每升土壤溶液中活菌數的理論值為＝(59+57+58)÷3÷0.1×10×103＝5.8×106個。統計結果是用菌落數來表示的，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此實際上每升土壤溶液中的活菌數比通過統計所得的這一數值要大。