Question

【題目】科學家用轉基因方法培育“巨型小鼠”。圖1為含大鼠生長激素基因的DNA及限制酶切割位點示意圖；圖3是轉基因過程中的一個步驟。請回答:

（1）據圖推斷，在獲得目的基因時，應使用限制酶____________酶。

（2）基因表達載體的構建是基因工程的核心，其目的是________________________，可以選擇圖2中的質粒____________作為目的基因的載體，理由是____________。

（3）圖3表示基因工程中將重組DNA分子導入受體細胞的過程，該步驟采用的技術方法是____________，通常____________選擇作為受體細胞。

（4）獲得含目的基因的細胞后，該細胞需要進行____________，當胚胎發育到____________階段時，可將其取出向受體移植，再經分娩產仔可獲得“巨型小鼠”。

Answer 1

【答案】 PvuI酶 使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用 A 選擇質粒A，其復制原點則不會被限制酶切割，復制原點序列保持完整（在用切割目的基因的限制酶切割質粒B時，其復制原點會被限制酶切割，從而影響重組質粒的自主復制） 顯微注射法 受精卵 胚胎體外培養 囊胚期

【解析】【試題分析】

本題結合培育轉基因“巨型小鼠”的過程，考查基因工程和胚胎工程的相關知識。考生可根據題圖獲取有用的信息，例如各限制酶的切割位點等，然后根據題意梳理所學知識，對各小題進行分析作答。

（1）據圖可知，EcoRⅠ酶的識別和切割位點位于目的基因（生長激素基因）上，所以獲得目的基因時，只能使用限制酶PvuI酶。

（2）構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用；根據第（1）題的分析可知，獲取目的基因只能使用限制酶PvuI酶，而該酶的識別和切割位點位于質粒B的復制原點上，所以可以選擇圖2中的質粒A作為目的基因的載體，理由是選擇質粒A，其復制原點則不會被限制酶切割，復制原點序列保持完整（在用切割目的基因的限制酶切割質粒B時，其復制原點會被限制酶切割，從而影響重組質粒的自主復制）。

（3）圖3表示基因工程中將重組DNA分子導入受體細胞的過程，該步驟采用的技術方法是顯微注射法，通常受精卵選擇作為受體細胞。

（4）獲得含目的基因的細胞后，該細胞需要進行胚胎體外培養，當胚胎發育到囊胚階段時，可將其取出向受體移植，再經分娩產仔可獲得“巨型小鼠”。