Question

【題目】下圖是我國利用基因工程方法生產人生長激素的示意圖。圖中的質粒是基因工程中常選用的載體———pBR322質粒， 表示青霉素抗性基因， 表示四環素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和HindIII切割形成的末端均不相同。據圖回答下列問題:

（1）為了使目的基因和質粒定向連接并且有利于受體細胞的篩選，③過程采用的酶是 ， ④過程采用的酶是 ， 它作用的化學鍵為。
（2）為了提高⑥過程的成功率，常用溶液處理大腸桿菌，作為受體的大腸桿菌細胞內，應不含基因，以利于篩選出含重組質粒的受體菌。

Answer 1

【答案】
（1）Pst I酶和EcoR I酶,DNA連接酶,磷酸二酯鍵
（2） (或 ),青霉素抗性基因和四環素抗性
【解析】解：(1)用兩種不同的限制酶來切割，可以獲得不同的粘性末端，在構建重組質粒時，能保證目的基因和質粒定向連接并且有利于受體細胞的篩選，，④過程采用的酶是DNA連接酶，它作用的化學鍵為磷酸二酯鍵。
(2)CaCl2處理細菌后，可以改變大腸桿菌的細胞壁的通透性，有利于重組質粒進入到大腸桿菌內，由于質粒中含有青霉素抗性基因和四環素抗性，故大腸桿菌不含這兩種基因時，可以在培養基中添加青霉素或四環素來選擇目的基因導入成功的大腸桿菌。
【考點精析】關于本題考查的基因工程的原理及技術和基因工程的應用，需要了解基因工程的原理是利用DNA重組技術；植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物，利用轉基因改良植物的品質；動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜產品品質、用轉基因動物生產藥物；基因治療：把正常的外源基因導入病人體內，使該基因表達產物發揮作用才能得出正確答案．