Question

根據基因工程的有關知識，回答下列問題：
(1)限制性內切酶切割DNA分子后產生的片段，其末端類型有________和________。
(2)質粒運載體用EcoRⅠ切割后產生的片段如下：
AATTC……G
G……CTTAA
為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是____________________________________
________________________________________________________________________。
(3)按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即________DNA連接酶和________DNA連接酶。
(4)反轉錄作用的模板是________，產物是________。若要在體外獲得大量反轉錄產物，常采用________技術。
(5)基因工程中除質粒外，________________和________________也可作為運載體。
(6)若用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是________________________。

Answer 1

(1)黏性末端　平末端　(2)切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同　(3)大腸桿菌（E.coli）　T₄　(4)mRNA(或RNA)　cDNA(或DNA)　PCR　(5)噬菌體　動植物病毒　(6)未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源DNA)的能力極弱

解析試題分析：(1)限制性核酸內切酶可以將DNA分子切成兩種類型的末端，平末端和黏性末端。
(2)兩種不同酶切割之后便于相連，所產生的黏性末端必須相同。
(3)ＥcoliDNA連接酶可以連接黏性末端，Ｔ４DNA連接酶可以連接兩種末端。
(4)反轉錄是以mRNA為模板逆轉錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA，利用ＰＣＲ技術進行大量擴增。
(5)基因工程中可以選用質粒，噬菌體、動植物病毒做載體。
(6)當受體細胞是細菌時，為了增大導入的成功率，常用Ca²⁺處理，得到感受態細胞，此時細胞壁和細胞膜的通透性增大，容易吸收重組質粒。
考點：基因工程
點評：本題著重考查基因工程方面的知識，屬于識記、理解層次的考查。