Question

【題目】為了調查某河流的水質狀況，某生物興趣小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作。回答下列問題：

（1）實驗室常用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基培養細菌，牛肉膏能提供的主要營養有 ___。一般用____瓊脂培養基培養酵母菌。

（2）如圖，該小組采用的是 _____________分離水樣中的細菌。操作時，接種環通過____滅菌，在第二次及以后的操作時，總是從上一次的末端開始，這樣做的目的是 ____。

（3）該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。根據培養皿上菌落的平均數可以計算河水中該細菌的密度，但計算的數據要比實際活菌的數目少，原因是____。除了上述的活菌計數法外， ________________也是測定微生物數量的常用方法。

（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一部分進行振蕩培養。結果發現：振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。分析其原因是： ___________________________________________________________________ 。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、磷酸鹽和維生素 麥芽汁 平板劃線法 灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 當兩個或者多個細胞連在一起時平板上觀察到的是一個菌落 顯微鏡直接計數 振蕩培養能提高培養液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率

【解析】

1.微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

2.劃線分離操作中的有關問題：

①在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環，在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環。

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結束灼燒
目的	避免接種環上可能存在的微生物污染培養基	殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種	殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染或感染操作者

②在灼燒接種環之后，要等其冷卻后再進行劃線，以免接種環溫度太高，殺死菌種。

③在進行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

（1）實驗室常用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基培養細菌，牛肉膏能提供的主要營養有碳源、氮源、磷酸鹽和維生素。培養酵母菌一般用麥芽汁瓊脂培養基。

（2）據圖分析可知，圖示接種方法為平板劃線法；對接種環常用的滅菌方法是灼燒滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。

（3）菌落是由一個細胞在固體培養基上繁殖而來的肉眼可見的子細胞群，因此單菌落可以看成一個種群；當兩個或者多個細胞連在一起時平板上觀察到的是一個菌落，所以稀釋涂布平板法計算的數據要比實際活菌的數目少；此外，顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法。

（4）振蕩培養能提高培養液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率，因此振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。