Question

【題目】某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答問題。

（1）接種前需要對培養基及培養皿等進行滅菌，常用的滅菌方法是____________。培養基中加入化合物A的目的是篩選________。

（2）實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是____________。

（3）培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量________的培養液，接入新的培養液中連續培養，使“目的菌”的數量________。

（4）轉為固體培養時，為獲得單菌落進行繼續篩選，常采用平板劃線法或____________法，接種后，應將培養皿________（填“正放”或“倒置”）

（5）平板劃線法操作在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？______________________________________________________

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 目的菌 異養需氧型 減少 增加 稀釋涂布平板 倒置 線條末端細菌數目比起始處少，從末端開始劃線能使細菌數目隨劃線次數增加而逐漸減少，最后得到由單個細菌繁殖形成的菌落

【解析】

本題考查微生物的培養，考查對培養基滅菌、接種和微生物培養方法的理解。根據培養基含有有機化合物A可判斷目的菌的同化類型，根據振蕩培養可判斷目的菌的異化類型。

（1）對培養基及培養皿等進行滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。培養基中加入化合物A，該化合物對生物有害，只有能降解化合物A的細菌才能在該培養基上生長，所以到篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）。

（2）振蕩培養可以使培養液中氧氣充足，培養基中需要加入有機化合物A，由此推測“目的菌”的代謝類型是異養需氧型。

（3）培養若干天后，若培養瓶中化合物A含量減少，說明培養液含有能高效降解化合物A的細菌，將該培養液接入新的培養液中連續培養，進行擴大化培養，可以使“目的菌”的數量增加。

（4）獲得單菌落后進行繼續篩選，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法，接種后，應將培養皿倒置，以防止培養皿蓋凝結的水滴影響菌落的生長。

（5）平板劃線法操作在作第二次以及其后的劃線操作時，線條末端細菌數目比起始處少，從末端開始劃線能使細菌數目隨劃線次數增加而逐漸減少，最后使單個細菌分離開，得到由單個細菌繁殖形成的菌落。