Question

【題目】下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程。請回答下列問題：

(1)過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優點是_____________________。

(2)過程②中首先需要處理大腸桿菌，使其處于感受態，VP40基因進人大腸桿菌后維持穩定并表達的過程稱為____________________________________。

(3)與植物原生質體融合相比，過程④特有的方法是用_____________處理。通常在選擇培養基中需加入抗生素，目的是____________________________。制備單克隆抗體時，先用特定的選擇性培養基進行篩選，獲得____________________________，該細胞的特點是__________________________________________。選擇培養基上存活的雜交瘤細胞產生的抗體___________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。然后對上述細胞進行抗體檢測，選取____________________________的細胞克隆化培養。

(4)圖示過程應用的生物技術有_____________________________。(至少答出兩種)

Answer 1

【答案】防止目的基因自身環化，防止目的基因與載體反向連接 轉化 滅活的病毒 防止培養過程中的雜菌污染 雜交瘤細胞 既能分泌專一的抗體、又能無限增殖 不是 能產生特定抗體(或能產生抗埃博拉病毒VP40抗體) 基因工程、動物細胞培養、動物細胞融合

【解析】

制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程，①是目的基因與運載體結合，②是將目的基因導入受體細胞，③過程表示給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產生特定B淋巴細胞，④過程是動物細胞融合過程，據此答題即可。

(1) 過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端，所以這樣處理的優點是防止目的基因環化。

(2) 過程②是將目的基因導入受體細胞，此過程首先需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態，VP40基因進入大腸桿菌后維持穩定并表達的過程稱為轉化。

(3) 與植物原生質體融合相比遠離基本相同，植物原生質體融合常用物理方法和化學方法，動物細胞融合常用的誘導因素有聚乙二醇和滅活病毒及電激，所以過程④特有的方法是用滅活的病毒處理．通常在選擇培養基中需加入抗生素，目的是防止培養過程中的污染．選擇培養基上存活的雜交瘤細胞，還需要進行克隆化培養和抗體檢測，經過多次篩選才可以獲得．所以選擇培養基上存活的雜交瘤細胞產生的抗體不是單克隆抗體。

(4) 圖示過程應用的生物技術有：①是目的基因與運載體結合，②是將目的基因導入受體細胞，③過程表示給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產生特定B淋巴細胞，④過程是動物細胞融合過程。