Question

Ⅰ、有一種病人不能抵抗疾病，只能生活在無菌室里，如果離開無菌室，就會受到病毒感染而死亡。原因是其體內缺乏一種腺苷酶基因。其治療方案如右圖所示。

（1）仿照上述方案設計一個為某男性患者治療血友病的方案，請完成有關步驟：

第一步：取出患者的皮膚細胞進行細胞培養；

第二步：提取目的基因；

第三步：                              

第四步：將重組體（即重組DNA）導入受體細胞，即讓這種攜帶有正常凝血因子基因的無害病毒去感染在體外培養的                   

第五步：根據病毒上的標記基因檢測皮膚細胞是否導入了正常凝血因子基因，并檢測是否產生了                 

第六步：將含有目的基因的皮膚細胞擴大培養，當各種指標達到要求后，再與膠原細胞混合，制成注射針劑。將含有這種活細胞的針劑注射到患者體內，并在患者體內表達，使患者的凝血因子達到可以止血的含量。

（2）基因工程中常用到的受體細胞有細菌、真菌和動植物細胞等，此處取患者本人的皮膚細胞作為受體細胞進行培養，是為了防止發生           。

（3）假設以大腸桿菌質粒作為運載體，并以同一種限制酶切割運載體與目的基因，將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。兩兩片段間連接產物中至少有          種環狀DNA分子。它們分別是                                   

                           。

Ⅱ、如圖為高等動物細胞亞顯微結構模式圖。請據圖作答：

（1）若此圖示旺盛分泌腸液（含多種消化酶）的小腸上皮細胞，則其形態結構必然具有下列          （填序號）特點。

①細胞分泌面有較多的皺褶；②皺褶下和內質網附近分布著較多的線粒體；③細胞的內質網與高爾基體很發達；④細胞內核糖體豐富。

（2）如果該細胞是效應B細胞，培養在含放射性標記的某種氨基酸的培養基中，之后在產物中檢測到帶有放射性的抗體。放射性出現的先后順序應該是           

（可供選擇的物質和結構是①細胞核  ②核糖體  ③染色體  ④線粒體  ⑤內質網  ⑥細胞膜  ⑦中心體  ⑧高爾基體）

（3）若此圖示衰老的細胞，除細胞核體積增大外，細胞膜發生的變化是                       

                      。

（4）右圖為該細胞進行細胞分裂過程中不同時期的細胞圖像，則該高等動物的性別是        ，其體細胞中染色體數目是          。

Answer 1

Ⅰ、（12分）

（1）第三步：目的基因與運載體結合（或將正常凝血因子基因重組到無害病毒的基因組中，形成重組體）

第四步：患者本人的皮膚細胞

第五步：凝血因子

（2）免疫反應

（3）3     運載體＋運載體、目的基因＋目的基因、運載體＋目的基因

Ⅱ、（10分）

（1）①②③④        （2）②⑤⑧⑥

（3）通透性功能改變，物質運輸功能降低 

（4）雌性      4