Question

【題目】據悉，艾滋病是中國法定傳染病報告死亡數據最高的病種，截至2017年9月30日我國累計報告艾滋病病例264302例，防艾迫在眉睫。早期獲得艾滋病病毒抗體的具體過程見如圖:

（1）通過培養雜交瘤細胞收集到的抗體最廣泛的用途是_________，如圖過程②表示_______，與HIV自愈者體內提取的抗體相比，培養雜交瘤細胞所獲得抗體的優點是____________。

（2）轉基因技術在 HIV的疫苗的研制工作得到廣泛應用，科學工作者利用該技術研制HIV疫苗的操作簡要路徑見如圖:

如圖中①過程所需的酶是__________，目的基因的載體有________（至少兩例），②表示_____________。 目的基因進入受體細胞并維持穩定和表達的過程稱為_______________。

（3）大腸桿菌質粒常作為基因工程目的基因的載體，將重組質粒導入大腸桿菌，一般情況下，需要制備感受態細胞，原因是__________________________。

Answer 1

【答案】用作體外診斷試劑 篩選 特異性強、靈敏度高、可大量制備 逆轉錄酶 質粒、噬菌體、動植物病毒、噬菌體衍生物等 基因表達載體的構建 轉化 未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源DNA）的能力極弱

【解析】

基因工程的工具：限制酶、DNA連接酶、運載體。

基因工程的操作步驟：獲取目的基因、構建基因表達載體、把目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和鑒定。

動物細胞融合的方法：電激法、聚乙二醇、滅活的病毒處理等。

圖1中：①細胞融合、②篩選。圖2中：①逆轉錄、②構建基因表達載體、③把目的基因導入酵母菌細胞中。

（1）通過培養雜交瘤細胞收集到的抗體是單克隆抗體，

可以作為診斷試劑，用于治療疾病和遠在藥物，其中最廣泛的用途是用作體外診斷試劑。如圖過程②表示篩選雜交瘤細胞，與HIV自愈者體內提取的抗體相比，培養雜交瘤細胞所獲得單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、可大量制備的優點。

（2）①逆轉錄過程用到的酶是逆轉錄酶，運載體有質粒、動植物病毒等。②表示構建基因表達載體，轉化即目的基因進入受體細胞并維持穩定和表達的過程。

（3）大腸桿菌屬于微生物，由于未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源DNA）的能力極弱，作為受體細胞需要經過鈣離子處理使其處于感受態，感受態細胞容易吸收周圍環境中的DNA。