Question

【題目】“生物導彈”可用于殺死人類某些癌細胞，制備“生物導彈”是單克隆抗體的重要應用之一，其過程如下圖所示。請據圖回答：

（1）在①-⑤批量生產A蛋白抗原的過程中，要快速獲得大量的A基因可采用_____技術。 在該技術中，解旋的方法是_______。

（2）在⑥-⑨批量生產“生物導彈”的過程中，⑦過程所用的“脾臟中的細胞”為_______，⑦過程區別于植物體細胞雜交技術所特有的誘導因素是_______，要得到所需的雜交瘤細胞一般要經過_____個階段篩選。

（3）培養雜交瘤細胞的培養液通常需要加入血清的作用是_______。

（4）步驟⑧獲得的單克隆抗體最終可以從_____（①小鼠腹水、②培養液）提取，抗體的靶向作用是利用了其_____的特點。

（5）單克隆抗體通過上圖所示的基因工程來制備，此技術的核心步驟是_______。

Answer 1

【答案】PCR 適當的高溫處理 B淋巴細胞（或漿細胞） 滅活的病毒處理 2 血清中還包含了一些動物的激素和酶等未知成分，可以促進細胞的生長發育 ①、② 特異性 基因表達載體的構建

【解析】

1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養或注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
2、圖中①②③為基因工程，④為早期胚胎培養，⑤⑥提取A蛋白，注入到小鼠體內獲取產生抗體的B淋巴細胞，⑦是細胞融合，⑧是篩選能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，制備單克隆抗體，進而制備生物導彈。

（1）為了快速的獲得A基因，可利用PCR技術在體外對DNA進行復制，PCR是利用高溫（90℃-95℃）解開雙鏈DNA。故在該技術中，解旋的方法是適當的高溫處理。

（2）過程⑦表示將受抗原刺激的B淋巴細胞（或漿細胞）和骨髓瘤細胞融合的過程，故⑦過程所用的“脾臟中的細胞”為B淋巴細胞（或漿細胞）；⑦過程區別于植物體細胞雜交技術所特有的誘導因素是用滅活的病毒處理；經過誘導融合后可得到3種融合的細胞和未融合的細胞，經過選擇培養基的篩選可得到雜交瘤細胞，再經過單一抗體陽性檢測篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，即該過程需要經過兩個階段的篩選。

（3）由于血清中包含了一些動物的激素和酶等未知成分，可以促進細胞的生長發育，故培養雜交瘤細胞的培養液通常還需要加入血清。

（4）雜交瘤細胞進行克隆化培養時，可用培養基培養或注入小鼠腹腔中培養，最后可從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。故步驟⑧獲得的單克隆抗體最終可以從①、②中提取。抗體與抗原可發生特異性結合，故抗體的靶向作用是利用了其特異性的特點。

（5）單克隆抗體還可通過基因工程來制備，此技術的核心步驟是基因表達載體的構建，所用的工具酶是限制酶和DNA連接酶。