Question

【題目】下圖是實(shí)驗(yàn)室分離和提取血紅蛋白的過(guò)程示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）步驟X表示______________，該步驟的目的是_________________________________。

（2）血紅蛋白釋放時(shí)，應(yīng)加入蒸餾水和___________，使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。步驟X、Y都要進(jìn)行離心，其中離心速度較快的是步驟__________（填X或Y）。

（3）用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，分子質(zhì)量較________的蛋白質(zhì)先被洗脫出來(lái)。步驟Z為______________，該過(guò)程中色譜柱內(nèi)不得有氣泡存在，其原因是______________________________。

Answer 1

【答案】紅細(xì)胞的洗滌 去除雜蛋白 40%體積的甲苯 Y 大 凝膠色譜柱的裝填 氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果

【解析】

血紅蛋白的提取和分離流程為：紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析→凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫。可見(jiàn)，X表示紅細(xì)胞的洗滌，Y表示分離血紅蛋白溶液，Z表示凝膠色譜柱的裝填，據(jù)此答題。

（1）據(jù)上分析可知，步驟X表示紅細(xì)胞的洗滌，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化。
（2）血紅蛋白釋放時(shí)，應(yīng)加入蒸餾水和40%體積的甲苯，使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。步驟Y要分離分子質(zhì)量更小的物質(zhì)，其離心速度要更快。
（3）用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先被洗脫出來(lái)。步驟Z為凝膠色譜柱的裝填。由于氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，所以在裝填凝膠色譜柱時(shí)，不得有氣泡產(chǎn)生。