Question

【題目】高溫淀粉酶在大規模工業生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示，請據圖回答有關問題：

（1） 過程①②合稱為_________。從功能上看，Ⅰ號培養基屬于________；該培養基中必須以________作為唯一碳源。 Ⅱ號培養基的接種方法為_________。

（2）對配制的培養基采用的滅菌方法是__________。

（3）在Ⅰ號培養基上挑出能產生淀粉酶的嗜熱菌菌落的鑒別方法是培養基上會出現以該菌的菌落為中心的______________；也可將得到的菌懸液轉接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養基上培養，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖所示情況，可判斷圖中周圍_____________的菌落含有所需菌種。

（4）如果高溫淀粉酶的產業化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的酶活性，則應選擇下圖中的______________（填寫字母）固定化工藝。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法選擇培養基淀粉平板劃線法高壓蒸汽滅菌法透明圈不顯藍色C

【解析】

本實驗目的是從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，因此需要配制以淀粉為唯一碳源的選擇培養基；圖示可見，①過程是梯度稀釋；②過程是用涂布平板法進行接種的過程。培養基配制和滅菌過程中，應注意先調節PH，后滅菌，一般培養基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，高壓蒸汽滅菌法是可以殺滅芽孢在內的所有微生物的一種滅菌方法。部分嗜熱菌在Ⅰ號培養基上生長時可產生淀粉酶，分解培養基中的淀粉后會在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大，說明產生淀粉越多，因此應挑選透明圈大的菌落接種在Ⅱ號培養基上繼續培養。

(1)據圖分析，從液體菌種到固體平板的過程及結論生長均勻分析，過程①②合稱為稀釋涂布平板法。按功能分，Ⅰ號培養基為選擇培養基，需要使用以淀粉為唯一的碳源；Ⅱ號培養基的接種方法是平板劃線法。

(2)對培養基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法。

(3)根據題意可知，Ⅰ號培養基上會出現以該菌的菌落為中心的透明圈可以鑒別嗜熱菌菌落。淀粉與碘液反應呈藍色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，則會出現無色的透明圈，故圖乙所示情況中無藍色透明圈的菌落含有所需菌種。

(4)據圖分析，A是物理吸附法，B是化學結合法，C是包埋法。因為酶容易從包埋材料中漏出，所以一般不使用包埋法；化學結合法可能會對酶活性產生影響，想要酶活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的酶活性，則應選擇圖中C。