Question

【題目】白細胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細胞介素的基因導入到酵母細胞中，使其分泌出有活性的白細胞介素。

（1）為增加白細胞介素基因的數量，可使用_____________________技術，但前提是必須知道基因的已知序列，目的是__________________________________________。

（2）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用_____________________處理酵母菌，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內，并且在其細胞內維持穩定和表達的過程，稱為_____________________。在表達過程中，啟動子需與_____________________識別和結合，從而驅動轉錄過程。

（3）在體液免疫過程中，白細胞介素是由_____________________細胞分泌的，為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母細胞作為受體細胞，可能原因是_____________________。

（4）在分泌型表達載體和白細胞介素基因所在的DNA分子上均有多個限制酶的酶切位點，圖示過程獲得有效表達的重組栽體使用了EcoRl和EcoR52兩種限制酶，比使用單一的限制酶，其優點是__________________________________________。

Answer 1

【答案】PCR 設計引物 Ca2+ 轉化 RNA聚合酶 T淋巴 細菌細胞中無內質網和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器 防止目的基因、表達載體發生自身環化或者防止目的基因反向接入到分泌型表達載體中

【解析】

分析題圖，圖示表示基因表達載體的構建過程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。

（1）基因工程中，擴增目的基因的方法為PCR技術，但前提是必須知道基因的已知序列，以便設計引物。

（2）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用Ca2+處理酵母菌，使酵母菌稱為感受態細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內，并且在其細胞內維持穩定和表達的過程，稱為轉化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動轉錄過程。

（3）在體液免疫過程中，白細胞介素是由T淋巴細胞分泌的；由于細菌屬于原核生物，細胞中無內質網和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器，因此為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母細胞作為受體細胞。

（4）在分泌型表達載體和白細胞介素基因所在的DNA分子上均有多個限制酶的酶切位點，圖示過程獲得有效表達的重組栽體使用了EcoRl和EcoR52兩種限制酶，比使用單一的限制酶，其優點是防止目的基因、表達載體發生自身環化或者防止目的基因反向接入到分泌型表達載體中。