Question

【題目】利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)�入豬細(xì)胞中，然后通過(guò)核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）對(duì) 1 號(hào)豬使用_____處理，使其超數(shù)排卵。選取處在_____時(shí)期的卵母細(xì)胞，去核后用于核移植，原因可能是_________。

（2）采集 2 號(hào)豬的組織塊，用_____或_____處理獲得分散的成纖維細(xì)胞，放置于37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。通常選擇 10 代以內(nèi)的成纖維細(xì)胞用于核移植的供體細(xì)胞，原因是_____。

（3）產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自于______號(hào)豬，基因編輯豬的的產(chǎn)生過(guò)程是_____（填“有性生殖”或“無(wú)性生殖”）。

（4）為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入 4 號(hào)豬，可采用的方法有_____。

Answer 1

【答案】促性腺激素 減數(shù)第二次分裂中期 卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核發(fā)育的物質(zhì) 胰蛋白酶 膠原蛋白酶 保持細(xì)胞正常的二倍體核型 2 無(wú)性生殖 DNA 測(cè)序技術(shù)（DNA 分子雜交技術(shù)）

【解析】

基因編輯是指對(duì)基因組進(jìn)行定點(diǎn)修飾的一項(xiàng)新技術(shù)。利用該技術(shù)，可以精確地定位到基

因組的某一位點(diǎn)上，在這位點(diǎn)上剪斷靶標(biāo)DNA片段并插入新的基因片段。此過(guò)程既模擬了基因的自然突變，又修改并編輯了原有的基因組，真正達(dá)成了“編輯基因”。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程

取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機(jī)體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞組織培養(yǎng)。

（1）圖中1號(hào)豬的作用是提供卵母細(xì)胞，為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需要對(duì)其使用促性腺激素處理，促其超數(shù)排卵。通常選取處在減數(shù)第二次分裂中期時(shí)期的卵母細(xì)胞，去核后用于核移植，選擇卵母細(xì)胞的原因是卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核發(fā)育的物質(zhì)，從而促進(jìn)細(xì)胞核全能性表現(xiàn)。

（2）圖中2號(hào)豬是供核的個(gè)體，因此需要獲取2號(hào)豬的組織塊，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理獲得單細(xì)胞懸液，置于37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。由于培養(yǎng)到10 代以內(nèi)的細(xì)胞能保持細(xì)胞正常的二倍體核型，因此，通常選擇10代以內(nèi)的成纖維細(xì)胞作為用于核移植的供體細(xì)胞。

（3）根據(jù)圖中的生產(chǎn)流程可知，產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自于2號(hào)豬，因?yàn)樘峁┘?xì)胞核的細(xì)胞來(lái)源于2號(hào)豬，由于基因編輯豬的的產(chǎn)生過(guò)程沒有經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的融合，因此基因編輯豬的生產(chǎn)過(guò)程屬于無(wú)性生殖。

（4）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是DNA分子雜交技術(shù)，因此，這里檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入 4 號(hào)豬應(yīng)采用的方法為DNA 測(cè)序技術(shù)（DNA 分子雜交技術(shù)）。