Question

【題目】下圖是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖。

據(jù)圖回答：

(1)獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在_______酶的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在______的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的______________序列，推測出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的_________________序列，再通過化學(xué)方法合成所需基因。

(2)利用PCR技術(shù)擴增基因A時，需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有______、_______、4種脫氧核糖核苷三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。

(3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為___________________________。

(4)在基因工程中，常用Ca2+處理D，其目的是________________________________________。

Answer 1

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄 DNA聚合酶 氨基酸 脫氧核苷酸 引物 模板(A基因) 基因表達載體 使其成為感受態(tài)細胞，有利于吸收重組DNA分子

【解析】試題分析：本題主要考查基因工程。要求學(xué)生熟知目的基因的獲取方法、PCR技術(shù)、基因表達載體的構(gòu)建方法、將目的基因?qū)�入受體細胞的方法。

（1）利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是：以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成雙鏈DNA分子；根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是：根據(jù)目標蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測DNA中脫氧核苷酸的排列順序，通過化學(xué)方法合成。
（2）PCR過程中需要耐熱性的DNA聚合酶（連接磷酸二酯鍵）、模板A基因（DNA復(fù)制的模板）、引物（作為復(fù)制的起點）和4種脫氧核糖核苷酸（提供原料和能量）等條件。
（3）目的基因A和運載體B結(jié)合，形成基因表達載體。
（4）在利用大腸桿菌做受體細胞時，需要先用Ca2+處理，使之成為感受態(tài)細胞，有利于其吸收重組DNA分子。