Question

【題目】幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因素，其不良預后是胃癌。據研究發現，目前我國有超過50%人感染了Hp病菌。Hp是微需氧菌，環境氧要求5%～8%，在大氣或絕對厭氧環境下均能生長，Hp中某種酶催化尿素水解形成“氨云”保護細菌在高酸環境下生存。

在患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養。實驗基本步驟如下：

配制培養基→滅菌、倒平板→X→培養→觀察。請回答：

（1）在配制培養基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有________，所以它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現____色環帶。

（2）步驟X的操作如下圖所示：

①微生物接種的方法很多，但都要注意____________；上圖所示方法為_____________。

②圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是_____________。

（3）在培養時，需將培養皿________并放在恒溫培養箱中。

Answer 1

【答案】脲酶 紅 防止雜菌的污染 稀釋涂布平板法 使微生物和無菌水混合均勻 倒置

【解析】

根據題意，Hp中某種酶催化尿素水解形成“氨云”，故Hp能產生脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養基堿性增強，pH升高，所以可以用檢測pH變化的方法來判斷尿素是否被分解，也可在培養基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨，pH升高，會使酚紅指示劑變紅。

（1）根據題意，“Hp中某種酶催化尿素水解形成氨云”，即Hp含有脲酶，能以尿素作為氮源，因此在配制培養基時，要加入尿素和酚紅指示劑；若有Hp，則脲酶能將尿素分解成氨，而氨會使培養基堿性增強，即pH升高，菌落周圍會出現紅色環帶。

（2）①微生物接種的方法很多，但都要注意防止雜菌的污染；接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示所示為稀釋涂布平板法。

②圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是使微生物和無菌水混合均勻。

（3）在培養時，需將培養皿倒置并放在恒溫培養箱中。