Question

【題目】科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖，請回答下列問題：

（1）圖中卵母細胞應在體外培養到______期，步驟①應先對卵母細胞進行______處理。

（2）由圖可知，步驟②要分離出ES細胞，需將重組胚胎培養到______期。

（3）步驟③選擇ES細胞作為受體細胞而不是上皮細胞，是因為ES細胞______，該過程需要先利用______技術擴增干擾素基因，其前提是要有一段已知干擾素基因的核苷酸序列以便合成______。

（4）步驟④應在培養液中加入______。為檢測干擾素基因是否在小鼠體內成功表達，可以采用______技術。

Answer 1

【答案】MII中（減數第二次分裂中） 去核 囊胚 在功能上具有發育的全能性 PCR 引物 分化誘導因子 抗原-抗體雜交

【解析】

分析題圖：圖示是利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療的流程，其中①表示獲得重組細胞的過程；②表示早期胚胎培養過程；③表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞。

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過核移植技術獲得重組細胞，接受細胞核的去核卵母細胞應該處于MⅡ期。

（2）ES細胞可以從囊胚的內細胞團中分離出來。

（3）步驟③選擇ES細胞作為受體細胞，是因為ES細胞在功能上具有發育的全能性；將目的基因導入受體細胞前，需要構建含有目的基因（干擾素基因）的表達載體。PCR技術可在體外大量擴增目的基因，其前提是要有一段已知干擾素基因的核苷酸序列以便合成引物。

（4）步驟④應在培養液中加分化誘導因子。為檢測目的基因的表達情況，可采用抗體-抗原雜交技術，若有雜交帶出現，表明目的基因已成功表達。