Question

【題目】運用轉基因技術，將奶牛細胞中編碼凝乳酶的基因轉移到大腸桿菌細胞中，達到大規模生產凝乳酶的目的。下圖表示用作運載體的質粒和目的基因所在DNA片段。下列操作與實驗目的不符的是

A. 用限制酶BamHⅠ、PstⅠ和DNA連接酶構建基因的表達載體

B. 用含氨芐青霉素的培養基篩選出的即為導入目的基因的細菌

C. 可用PCR技術大量擴增目的基因

D. 用Ca2+處理大腸桿菌使其易于轉化

Answer 1

【答案】B

【解析】

基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術，是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品。基因工程技術為基因的結構和功能的研究提供了有力的手段。

A、限制酶不能破壞目的基因，也不能破壞質粒上的標記基因，且應該用不同的限制酶進行切割，以防止質粒和目的基因自身的黏性末端連接或防止目的基因與載體反向連接，所以構建圖示的重組質粒的酶切位點應該選BamHI、PstI，用DNA連接酶將重組基因連接，正確；

B、運載體和導入目的基因的載體上都存在氨芐青霉素抗性基因，因此不能依此來確定篩選出的是否為導入目的基因的細菌，錯誤；

C、可用PCR技術大量擴增目的基因，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點，正確；

D、用Ca2+處理大腸桿菌增加細菌細胞壁的通透性，使其成為感受態細胞，易于轉化，正確。

故選B。