Question

【題目】真核生物細胞內(nèi)，大量DNA和蛋白質(zhì)以及一些RNA等混雜在一起，難以分離．生物興趣小組的同學為了獲得純度相對較高的DNA展開了實驗探究．
（1）分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)理化性質(zhì)的不同而采取一定的方法，如圖是從各種物質(zhì)之間的差異角度開展研究： a、取雞血細胞懸液10mL，加蒸餾水20mL，同時用玻璃棒（填“輕輕攪拌”或填“快速攪拌”）．過濾，取濾液，轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中．
b、沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，用玻棒沿一個方向（填“輕輕攪拌”或填“快速攪拌”），同時不斷收集析出的物質(zhì)．
如圖是根據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線，請據(jù)圖分析：
c、如果只要收集纖維蛋白，可采取的措施是 ．
d、先用飽和度40%的硫酸銨溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白，再在飽和度約為的硫酸銨溶液中析出DNA（既保證DNA提取量較大又避免其他雜質(zhì)過多），與此同時析出的物質(zhì)還有 ．
（2）如果要進一步去掉其他雜質(zhì)，盡可能提高獲得的DNA純度，可采取的兩種辦法有：將DNA與球蛋白的混合物加入到中，收集再次析出物；用處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液．

Answer 1

【答案】
（1）溶解度；快速攪拌；輕輕攪拌；在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物；50%；球蛋白
（2）冷卻酒精；嫩肉粉（木瓜蛋白酶）
【解析】解：（1）分析曲線圖可知，不同物質(zhì)在不同濃度的硫酸銨中的析出的相對量有所差別，即分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)之間溶解度的差異角度開展研究：

a、取雞血細胞懸液10mL，加蒸餾水20mL，此時可以用玻璃棒快速攪拌，以加速血細胞的破裂．

b、沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，為了防止將DNA的絮狀物攪碎，此時應用玻棒沿一個方向輕輕攪拌，同時不斷收集析出的物質(zhì)．

c、圖中看出，纖維蛋白的溶解度最低，硫酸銨濃度在20%之前已經(jīng)開始析出，說明溶解度開始減小；在濃度為30%時析出最快，說明此時的溶解度最低，并且超過30%后球蛋白也將逐漸析出，因此如果只要收集纖維蛋白，可以在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物．

d、圖中看出，DNA在飽和度約為50%的硫酸銨溶液中溶解度最小，與此同時析出的物質(zhì)還有球蛋白，只是球蛋白析出量較少．（2）如果要進一步去掉其他雜質(zhì)，盡可能提高獲得的DNA純度，可將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中，由于DNA不溶于酒精，而其它雜質(zhì)可溶于酒精，因此收集再次析出物；酶具有專一性，可以用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液，此時蛋白質(zhì)可以水解，因此可以分離DNA和蛋白質(zhì)；又由于DNA和蛋白質(zhì)對高溫的耐受性不同，蛋白質(zhì)容易將溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液放在60～75℃的恒溫水浴箱中保溫一段時間．

所以答案是：（1）溶解度 a、快速攪拌 b、輕輕攪拌 c、在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物 d、50% 球蛋白（2）冷卻酒精 嫩肉粉（木瓜蛋白酶）