Question

【題目】酒是以水、高粱、小麥為原料，通過固態發酵而成。環境中存在的獨特微生物是釀制酒獨特品質的關鍵因素之一。為了提取環境中的獨特菌種，某高中學校生物研究性學習小組以優質的高粱和小麥為原料，制作培養基，搜集、分離空氣中的微生物。請回答下列問題：

（1）該培養基在接種微生物前，必須先進行_____滅菌。

（2）將上述培養基暴露在空氣中培養一段時間后，取10g該培養基用無菌水制成100mL樣品溶液。再將樣品溶液稀釋104倍后，各取樣品溶液0.1mL，在5個培養基平板上接種。培養一段時間后，平板上長出的微生物菌落數分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是_____。每克培養基樣品中的微生物數量是_____個。

（3）與用血細胞計數板記數相比，該計數方法測得的微生物數目要低。其原因是_____________ 。

（4）釀酒的主要微生物將葡萄糖分解為酒精的酶存在于_____。其生產酒的總反應式可表示為_____。

（5）為了研究發酵罐中釀酒微生物的生長情況，常要取樣統計分析，并測定pH。若某同學未將取樣的樣品貼上標簽，那么，怎樣確定取樣樣品的先后順序_____。主要依據是_____。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽 稀釋涂布平板法 1.75×108 死亡的微生物不能形成菌落；兩個或多個菌體連在一起時形成一個菌落 細胞質基質 根據發酵液的pH大小排序 微生物發酵過程中發酵液的pH值逐漸變小

【解析】

微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。每毫升樣品中的細菌數=（平板的平均菌落數÷涂布的體積）×稀釋的倍數。參與釀酒的微生物是酵母菌，代謝類型為異養兼性厭氧型，在有氧條件下，酵母菌大量繁殖，反應式為，無氧條件下進行酒精發酵，反應式為。

（1）培養基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。

（2）根據題干可知，菌落計數采用的方法為稀釋涂布平板法，統計的菌落數應介于30~300之間，故選菌落數為156、178和191的平板計數。每克培養基樣品中的微生物數量對應的應該是每毫升樣品溶液中的微生物數量，因此每克培養基樣品中的微生物數量為（156+178+191）÷3÷0.1×105=1.75×108個。

（3）由于死亡的微生物不能形成菌落，以及兩個或多個菌體連在一起時形成一個菌落，往往統計的是一個菌落，所以用稀釋涂布平板法測得的微生物數目要低。

（4）釀酒的主要微生物是酵母菌，酵母菌通過無氧呼吸將葡萄糖分解為酒精，無氧呼吸的場所是細胞質基質，總反應式為。

（5）發酵過程會產生CO2使培養液pH逐漸降低，因此根據發酵液的pH大小確定取樣樣品的先后順序。