Question

【題目】研究表明從母瘤分離脫落的癌細(xì)胞首先要與正常細(xì)胞粘附才能轉(zhuǎn)移。為研究物質(zhì)X對癌細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附的影響，請根據(jù)以下提供的實驗材料與用具，完善實驗思路，預(yù)測實驗結(jié)果并進(jìn)行分析與討論。

材料與用具：培養(yǎng)瓶若干個、液體培養(yǎng)基、物質(zhì)X、癌細(xì)胞細(xì)胞株、內(nèi)皮細(xì)胞懸液、CO2培養(yǎng)箱、PBS溶液（用于洗去未粘附的細(xì)胞）

（要求與說明：不考慮培養(yǎng)液成分變化對培養(yǎng)物的影響；實驗條件適宜）

（1）實驗思路：

①取培養(yǎng)瓶若干個均分為三組，分別加入等量且適量的液體培養(yǎng)基和內(nèi)皮細(xì)胞懸液，置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使培養(yǎng)瓶中鋪滿單層內(nèi)皮細(xì)胞。

②_____。

③同時分別_____。置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間。

④用PBS溶液洗去未貼壁的細(xì)胞，測定相關(guān)值并計算細(xì)胞粘附率。

⑤對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析與處理。

（2）下圖為實驗所測得的細(xì)胞粘附率，請根據(jù)圖示結(jié)果，用文字描述該實驗結(jié)果并得出實驗結(jié)論：

結(jié)果：_____。

結(jié)論：_____。

（3）分析與討論

①實驗用的癌細(xì)胞細(xì)胞株可以通過_____法建立。獲取癌細(xì)胞時需用_____處理癌細(xì)胞株，將癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入含內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)瓶后所進(jìn)行的培養(yǎng)稱為_____培養(yǎng)。

②導(dǎo)致癌細(xì)胞從母瘤分離脫落的原因可能是_____。根據(jù)實驗可推測：物質(zhì)X可能是通過減少腫瘤細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附率，來達(dá)到_____的作用。

Answer 1

【答案】加入用液體培養(yǎng)基配制的不同濃度的物質(zhì)X（濃度為100和300μg/ml），對照組加入等體積的液體培養(yǎng)基 取等量的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入上述培養(yǎng)瓶中（取等量的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入鋪滿單層內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中） 與正常對照組相比，加入物質(zhì)X后，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率明顯降低，同時隨著劑量越高，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率下降越明顯。 物質(zhì)X可降低癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率。（而且作用效果與物質(zhì)X的濃度有關(guān)） 克隆培養(yǎng) 胰蛋白酶 傳代 癌細(xì)胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少 抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移

【解析】

1、本實驗的目的是為了研究不同濃度的物質(zhì)X對癌細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附的影響，因此自變量是不同濃度放入物質(zhì)X溶液，因變量是細(xì)胞粘附率，其余均為無關(guān)變量。

2、實驗設(shè)計應(yīng)該遵循對照原則和單一變量原則，此外還應(yīng)該遵循平行重復(fù)原則，這樣可以減小實驗的誤差。

（1）實驗思路：根據(jù)分析該實驗的自變量和因變量，所以在步驟②中設(shè)計自變量。

②加入用液體培養(yǎng)基配制的不同濃度的物質(zhì)X（濃度為100和300μg/ml），對照組加入等體積的液體培養(yǎng)基。

③同時分別取等量的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入上述培養(yǎng)瓶中（取等量的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入鋪滿單層內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中）。置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間。

（2）結(jié)果：與正常對照組相比，加入物質(zhì)X后，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率明顯降低，同時隨著劑量越高，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率下降越明顯。

結(jié)論：物質(zhì)X可降低癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率。（而且作用效果與物質(zhì)X的濃度有關(guān)）。

（3）分析與討論：

①實驗用的癌細(xì)胞細(xì)胞株可以通過克隆培養(yǎng)法建立。獲取癌細(xì)胞時需用胰蛋白酶，將其分散成單個細(xì)胞，將癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入含內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)瓶后所進(jìn)行的培養(yǎng)稱為克隆培養(yǎng)。

②導(dǎo)致癌細(xì)胞從母瘤分離脫落的原因可能是癌細(xì)胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少。根據(jù)實驗可推測：物質(zhì)X可能是通過減少腫瘤細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附率，來達(dá)到抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。