Question

【題目】某研究小組按下圖所示過程從土壤中篩選能高效降解尿素的細菌。請回答下列問題。

（1）步驟②是 。為了篩選目的菌，步驟③的培養基中加入的唯一氮源為 ，這種培養基屬于 （填“鑒別”或“選擇”）培養基。

（2）用平板劃線法接種細菌是，不需用下列哪種器具？ （填字母）。在灼燒接種環之后，要等其冷卻后再進行劃線，原因是 。

（3）將接種后的培養基和作為對照的 培養基同時放入恒溫培養箱中培養，為了對初步篩選出來的菌種作進一步的鑒定，可在培養基中加入 指示劑，若指示劑變成 色，則說明該菌種能夠分解尿素。

Answer 1

【答案】（1）樣品稀釋（或“系列稀釋”、“梯度稀釋”） 尿素 選擇

（2）C 避免溫度過高的接種環把菌種殺死

（3）一個為接種的（或“空白”） 酚紅 紅

【解析】

試題分析：（1）步驟②是梯度稀釋樣品。按功能不同，培養基可分成兩類，鑒別培養基和選擇培養基，培養基中不加其它氮素，只把尿素作為唯一氮源，其目的是想從眾多微生物中選出能分解尿素的目的菌。

（2）平板劃線法接種細菌時，需要準備裝有菌種的試管，接種環用于取菌種，酒精燈用于灼燒接種環滅菌等，所以本題選C（用于平板劃線法的接種鉤）。在灼燒接種環之后，要等其冷卻后再進行劃線，原因是避免溫度過高的接種環把菌種殺死。

（3）將接種后的培養基和作為對照的空白培養基同時放入恒溫培養箱中培養，為了對初步篩選出來的菌種作進一步的鑒定，可在培養基中加入酚紅指示劑，因為體內目的菌的脲酶能將尿素分解成氨，氨可以作為細菌的氮源，同時會使培養基的pH升高，升高的PH會使酚紅指示劑變為紅色，因此可以通過檢測培養基pH的變化來判斷尿素是否被分解。

方法	平板劃線法	稀釋涂布平板法
注意事項	（1）接種環的灼燒：①第一次劃線前：殺死接種環上的微生物，避免污染培養物；②每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端；③劃線結束后：殺死殘留菌種，避免污染環境和感染操作者。 （2）灼燒接種環之后，要冷卻后再進行操作，以免溫度太高殺死菌種。 （3）劃線時最后一區域不要與第一區域相連。 （4）劃線用力要大小適當，防止用力過大將培養基劃破。	（1）稀釋操作時：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和移液管應在離火焰1～2 cm 處 （2）涂布平板時：①涂布器用體積分數為70%酒精消毒，取出時，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精燈與培養皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體。
目的	在培養基上形成由單個菌種繁殖而來的子細胞群體——菌落
培養	平板冷凝后倒置培養，使培養基表面的水分更好地揮發，防止皿蓋上水珠落入培養基造成污染