Question

【題目】以下是有關現代生物科技的兩個問題。請回答：

I.下而是與動物細胞工程有關的問題，請分析回答：

(1)在進行動物細胞培養時，首先要將動物組織剪碎，然后用___處理，以使其分散成單個細胞，制成細胞懸液。

(2)氣體環憧中CO2的作用是_________。

(3)應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內的細胞.原因是10代以后細胞可能發生___________。

(4)單克隆抗體與常規抗體相比，具有________的特點。

II.轉基因抗病香蕉的培育過程如下圖所示，圖中I.、I、EcoRI、ApaI等為限制酶，質粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點。下圖表示四種限制酶的識別序列及酶切點。

(1)若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaI對圖中對應的位點進行切割?_______。要獲得含抗病基因的重組質粒能否用PstI、 ApaI限制酶切割質粒?_________。

(2)卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，根據這一原理可以利用含卡那霉素的培基篩選已導入重組質粒的香蕉細胞，由此推斷重組質粒中應含有___基因。作為標記基因。

(3)②、③階段是否可使用同種培養基?_______ 。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶 維持培養液pH 遺傳物質的突變 特異性強，靈敏度高 不能 不能 抗卡那霉素 不能

【解析】分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，其中SmaⅠ酶的切割位點位于抗病基因（目的基因）上；質粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點，所以要活動重組質粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進行切割，①→②表示脫分化過程、②→③表示再分化過程、④是新植體。

Ⅰ、（1）在進行動物細胞培養時，首先要將動物組織剪碎，然后用胰蛋白酶處理，以使其分散成單個細胞，制成細胞懸液。

（2）氣體環境中CO2的作用是維持培養液pH．

（3）應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內的細胞，原因是10代以后細胞沒有發生遺傳物質的突變，能保持正常的二倍體核型。

（4）單克隆抗體與常規抗體相比，優點是：特異性強，靈敏度高，可大量制備。

Ⅱ、（1）因為限制酶SmaⅠ的切割位點位于抗病基因上，對SmaⅠ位點進行切割破壞了抗病基因的結構，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應的位點進行切割．要獲得含抗病基因的重組質粒，也不能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質粒，因為含有抗病基因的外源DNA分子上沒有ApaⅠ限制酶切割位點。

（2）欲利用含卡那霉素的培養基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，重組質粒中應同時含有抗卡那霉素基因，作為標記基因。

（3）決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要．②、③階段培養基中生長素與細胞分裂素的比值不同，因此這兩個階段不能是用同種培養基。