Question

【題目】環磷酰胺（CP)是常用的化療藥物，研究表明CP對遺傳物質具有損傷效應，可導致染色體結構變異產生微核。現欲以微核率（含微核的細胞數占觀察細胞總數的比例）為檢測指標，探究輪葉黨參醇提取物水溶部分（WACL)的濃度和給藥順序對CP所致突變的拮抗作用，請根據以下提供的實驗材料，提出實驗思路并進行分析。

材料與用具：大鼠外周血淋巴細胞懸液，動物細胞培養液，濃度為4mg/mL的WACL溶液，20μg/mL的CP溶液，生理鹽水，培養瓶若干個，顯微鏡，血細胞計數板等。[要求與說明：微核是喪失著絲粒的染色體斷片于末期之后單獨形成的一個或幾個規則的次核（如圖）；染色和制作裝片的具體方法不作要求；實驗條件適宜。]

請回答：

(1)實驗思路（其中實驗分組用表格形式表示)

①

②

③

(2)分析與討論

①異常細胞的細胞周期中，觀察計數微核的最佳時期應是_________。

②若本實驗所得結果如下圖所示。

據此可以得出的結論是：a.________； b._________。

Answer 1

【答案】 ①利用濃度為4mg/mL的WACL溶液配置成0.25mg/mL、1mg/mL的溶液。

②取11個培養瓶，并編號，并在瓶中加入等量且適量的大鼠外周血淋巴細胞懸液和培養液。

③實驗分組；濃度和加藥順序表中位置可合理互換；只寫前三行，另附加語言“另設只加生理鹽水、CP對照組”也得分

表：給藥順序和WACL對CP所致突變拮抗作用的實驗分組

④按上述分組，在各培養瓶中加入等量的相關溶液，培養一段時間。

⑤取各培養瓶中培養液，在顯微鏡下統計微核細胞數和細胞總數，記錄結果并計算微核率。 間期 a.不同濃度的WACL均對CP所致突變有拮抗作用

b.中低濃度先加WACL的效果好于其他兩種加藥順序

【解析】試題分析：依據實驗遵循的單一變量原則，由題意和反映實驗結果的柱形圖所呈現的信息確定實驗目的，找出實驗變量（自變量、因變量、無關變量），在此基礎上來對實驗組和對照組進行設置，進而進行相關問題的解答。

(1)依題意可知：本實驗目的是探究輪葉黨參醇提取物水溶部分（WACL)的濃度和給藥順序對CP所致突變的拮抗作用，因此自變量是黨參醇提取物水溶部分（WACL)的濃度和給藥順序，因變量是觀察統計含微核的細胞數占觀察細胞總數的比例，即微核率。其它對實驗結果有影響的無關變量應控制相同且適宜。分析柱形圖所呈現的信息，根據實驗設計遵循的對照原則，可知：（一）在探究輪葉黨參醇提取物水溶部分(WACL)對環磷酰胺(CP)所致突變的拮抗作用時，需設置WACL濃度為0.25mg/mL、1mg/mL、 4mg/mL的三個實驗組，以及只加生理鹽水和只加CP的對照組。（二）為探究給藥順序對實驗結果的影響，在相同的CP濃度、相同的WACL濃度下，又需設置給藥順序為：①先加CP、后加WACL，②先加WACL、后加CP，③同時加入WACL和CP的三組。綜合（一）和（二），共需取11個培養瓶用來體外培養大鼠外周血淋巴細胞。詳細的實驗步驟如下：

①利用濃度為4mg/mL的WACL溶液配置成0.25mg/mL、1mg/mL的溶液。

②取11個培養瓶，并編號，并在瓶中加入等量且適量的大鼠外周血淋巴細胞懸液和培養液。

③實驗分組：給藥順序和WACL對CP所致突變拮抗作用的實驗分組如下表：

④按上述分組，在各培養瓶中加入等量的相關溶液，培養一段時間。

⑤取各培養瓶中培養液，在顯微鏡下統計微核細胞數和細胞總數，記錄結果并計算微核率。 (2) ①由題意“微核是喪失著絲粒的染色體斷片于末期之后單獨形成的一個或幾個規則的次核”可知：異常細胞的細胞周期中，觀察計數微核的最佳時期應是間期。

②分析柱形圖呈現的信息可知，本實驗可以得出的結論是： a.不同濃度的WACL均對CP所致突變有拮抗作用；b.中低濃度先加WACL的效果好于其他兩種加藥順序。