Question

【題目】生物技術實踐與人們生產和生活密切相關，也為許多學生將來就業奠定知識基礎和能力基礎．請回答下列有關生物技術實踐中的問題：
（1）無菌技術主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染．常用的滅菌方法有滅菌、干熱滅菌和滅菌．
（2）在果醋、泡菜的制作過程中，需要氧氣的是；在制作果醋過程中，榨取的果汁非常渾濁，解決的方法是 ．
（3）果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作過程中主要利用的微生物分別為酵母菌、、、 ， 屬于原核生物的是 ， 只進行無氧呼吸的是 ．
（4）在制備固定化酵母細胞實驗中，海藻酸鈉的濃度對實驗結果影響較大，若濃度過高，則 ， 通常評價該實驗結果主要是觀察凝膠珠的 ．
（5）DNA粗提取與鑒定
①利用DNA在不同濃度的溶液中溶解度的不同，通過控制其溶液的濃度去除雜質．
②DNA的析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、溶液可使DNA析出．
③DNA的鑒定：將析出的DNA溶于物質的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中，加入 ， 沸水浴加熱，溶液變藍．
（6）血紅蛋白的提取和分離的實驗中，在洗脫過程中加入物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是 ．
（7）提取植物芳香油時可采用的方法有、和 ．
（8）玫瑰油被稱為“液體黃金”，是世界香料工業中不可取代的原料，多用于制造高級香水等化妝品．如圖表示提取玫瑰油的流程，其中A表示；B表示 ， 其中加入NaCl的作用是 ．

（9）植物芳香油溶解性的特點是難溶于 ， 易溶于 ， 因此可用后者作為提取劑來提取植物芳香油．
（10）若利用組織培養技術對玫瑰進行無性繁殖，玫瑰的組織培養需在培養基上進行，選取 ， 沖洗干凈后，用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分數為70%的中搖動2～3次，外植體再經過和過程培育成植株幼苗，該過程的關鍵激素是、 ．
（11）殺蟲基因通過①﹣④，最終在宿主細胞內維持穩定和表達的過程叫做；其中（填標號）是轉基因抗蟲水稻的核心步驟，需要的工具酶是、 ．
（12）“華恢1號”的培育過程應用的主要生物技術有、 ．
（13）構建重組質粒時，常用Ti質粒作為載體，是因為Ti質粒上具有 ， 它能把目的基因整合到受體細胞（植株細胞）中上．
（14）圖2是天然土壤農桿菌Ti質粒結構示意圖（部分基因及部分限制酶作用位點），組建理想的載體需要對天然的質粒進行改造．據圖分析：
①人工改造質粒時，要使抗蟲基因表達，還應插入 ， 其作用是 ．
②人工改造質粒時，先用限制酶Ⅰ處理，可以去除質粒上的基因和基因（填上圖質粒上的基因名稱），保證重組質粒進入水稻細胞后不會促進細胞的分裂和生長；然后再用限制酶Ⅱ分別切割經過改造的理想質粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構成重組Ti質粒，那么成功導入抗蟲基因的水稻胚細胞將不能在含（填抗生素名稱）的培養基上生長．
（15）動物細胞培養時，需要利用酶處理組織塊，使其分散成單個細胞；培養過程中細胞表現出和等特點；通常還要在細胞培養液中添加一定量的 ， 以防培養過程中的污染，另外通常需加入等一些天然成分．
（16）雜交瘤細胞的特點是 ， 單克隆抗體與普通血清抗體相比較，具有并可能大量制備的特點．
（17）植物體細胞雜交之前，需要用去除細胞壁，獲得具有活力的 ， 一般用作為誘導劑來誘導其融合．
（18）試管牛的生產過程中，在試管中完成的步驟為和 ， 將胚胎培養發育至階段再移植到代孕母體體內．
（19）對污染的礦山進行生態修復，一般選用耐重金屬污染的本地植物進行種植，體現了生態工程的原理．

Answer 1

【答案】
（1）灼燒；高壓蒸汽（答案順序可顛倒）
（2）果醋；用果膠酶處理
（3）醋酸菌；毛霉；乳酸菌；醋酸菌和乳酸菌；乳酸菌
（4）不易形成凝膠珠；顏色和形狀
（5）NaCl；（體積分數為95%的）酒精溶液；二苯胺
（6）準確模擬生物體內的生理環境，保持體外的pH和體內的一致
（7）萃取法；蒸餾法；壓榨法
（8）水蒸氣蒸餾；無水硫酸鈉；增加鹽的濃度，使油和水出現明顯的分層
（9）水；有機溶劑
（10）MS；生長旺盛的嫩枝；酒精；脫分化；再分化；細胞分裂素；生長素
（11）轉化；①；限制性核酸內切酶（限制酶）；DNA連接酶
（12）基因工程技術（轉基因技術）；植物組織培養技術
（13）T﹣DNA；染色體的DNA
（14）啟動子；RNA聚合酶提供識別和結合的部位，驅動轉錄；tms；tmr；四環素
（15）胰蛋白酶或膠原蛋白酶；細胞貼壁；接觸抑制；抗生素；血清、血漿
（16）既能迅速大量繁殖，又能產生專一的抗體；特異性強、靈敏度高
（17）纖維素酶和果膠酶；原生質體；聚乙二醇（PEG）
（18）體外受精；胚胎的早期培養；桑椹胚或囊胚
（19）協調與平衡
【解析】解：（1）動物細胞培養時，需要利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊，使其分散成單個細胞；培養過程中細胞表現出細胞貼壁和接觸抑制等特點；通常還要在細胞培養液中添加一定量的抗生素，以防培養過程中的污染，另外通常需加入血清、血漿等一些天然成分．（2）雜交瘤細胞的特點是既能迅速大量繁殖，又能產生專一的抗體，單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高并可能大量制備的特點．（3）植物體細胞雜交之前，需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，獲得具有活力的原生質體，一般用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑來誘導其融合．（4）試管牛的生產過程中，在試管中完成的步驟為體外受精 和胚胎的早期培養，將胚胎培養發育至桑椹胚或囊胚階段再移植到代孕母體體內．（5）對污染的礦山進行生態修復，一般選用耐重金屬污染的本地植物進行種植，體現了生態工程的 協調與平衡原理．
【考點精析】認真審題，首先需要了解動物細胞與組織培養過程(取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養)，還要掌握單克隆抗體的制備(對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養的方法培養骨髓瘤細胞并提取；促使它們細胞融合；在特定的選擇培養基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規模培養或注射入小鼠腹腔內增殖，從細胞培養液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體)的相關知識才是答題的關鍵．