Question

【題目】下面是科學家利用現代生物技術研制用于癌癥治療的鼠一人嵌合抗體的流程圖。請回答:

（1）利用蛋白質工程技術對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據預期________，設計________，進一步推測應有的氨基酸序列，最終通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠－人嵌合抗體基因，然后導入鼠淋巴細胞中使其表達。在lg基因表達載體構建的過程中，人和鼠的基因要用同一種限制酶切割核苷酸之間的________。

（2）圖中嵌合載體啟動子位于基因的首端,它是________識別和結合的部位；終止子是________的終點；嵌合載體中還應含有________，以便重組DNA的鑒定和篩選。

（3）圖中的“抗體分泌細胞”名稱是________，檢測目的基因在淋巴細胞中是否得到表達可用________技術。

（4）在制備單克隆嵌合抗體過程中要進行兩次篩選，第一次篩選的目的是________；第二次篩選的目的是________。

Answer 1

【答案】嵌合抗體的功能 嵌合抗體的結構 磷酸二酯鍵 RNA聚合酶 轉錄 標記基因 漿細胞（效應B細胞） 抗原－抗體雜交 獲得雜交瘤細胞 獲得能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞

【解析】

蛋白質工程的基本途徑是：從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應的脫氧核糖核苷酸序列（DNA），所以利用蛋白質工程技術對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據預期鼠－人嵌合抗體的功能設計預期嵌合抗體的結構，進一步推測應有的氨基酸序列，最終通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠－人嵌合抗體基因，然后導入鼠淋巴細胞中使其表達。基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因，其中啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結合位點，能控制著轉錄的開始；終止子在基因的尾端，它控制著轉錄的結束；標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。制備單克隆抗體需要進行2次篩選，第一次篩選是在兩細胞融合后，目的是選出符合要求的雜交瘤細胞，而第二次篩選則是在雜交瘤細胞培養后，篩選得目的是為了選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞。

（1）利用蛋白質工程技術對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據預期嵌合抗體的功能，設計嵌合抗體的結構；在Ig基因表達載體構建的過程中，人和鼠的基因要用同種限制性核酸內切酶切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）圖中位于基因首端的嵌合載體啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位；終止子是轉錄的終點；此外嵌合載體中還應含有標記基因，以便重組DNA的鑒定和篩選。

（3）分泌抗體的是漿細胞，檢測目的基因在淋巴細胞中是否得到表達可用抗原-抗體雜交技術。

（4）在制備單克隆嵌合抗體過程中要進行篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞；第二次篩選的目的是獲得能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞。