Question

【題目】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。

據圖回答下列問題：

（1）過程①所需的酶是_____________。

（2）過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的__________存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。

（3）原生質體經過細胞壁再生，進而___________形成愈傷組織。

（4）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株1-4進行PCR擴增的結果。據圖判斷，再生植株1-4中是雜種植株的有__________。

（5）對雜種植株進行______ 接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。

Answer 1

【答案】纖維素酶和果膠酶 葉綠體 脫分化 1、2、4 黑腐病菌

【解析】

據圖分析，過程①表示原生質體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，過程②表示誘導原生質體融合，體現了生物膜的結構特點：具有一定的流動性。將雜種細胞培養成完整植株的過程是植物組織培養，經過脫分化形成愈傷組織，再分化形成完整植株。

（1）過程①表示原生質體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁。

（2）用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結構是葉綠體，可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志。

（3）原生質體通過細胞壁再生形成雜種細胞，進而經過脫分化形成愈傷組織。

（4）根據圖譜，花椰菜含有堿基對為300 和600 的DNA 片段，黑芥還有堿基對為1000、1300 和1500 的片段，再生植株3，只含有長度為300 和600 的片段，與花椰菜一致，1、2、4 既含有花椰菜DNA 片段，又含有黑芥DNA 片段，為雜種植株。

（5）對雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株。