Question

10．科研人員從一些荒漠植物中成功克隆抗旱功能基因培育出抗旱耐鹽減和耐貧瘠能力明顯的轉基因紫花苜蓿新品系，它的研究成功對改良與利用大面積鹽荒地、改善生態環境以及促進農牧業可持續發展具有現實意義．結合所學知回答下列問題：
（1）題目中說的“克隆”實際上指的是PCR技術．
（2）獲取目的基因后需要進行基因表達載體的構建，構建完成的表達載體中需含有啟動子、終止子、復制原點、標記基因和目的基因．
（3）紫花苜蓿為雙子葉植物，常用的導入目的基因的方法是農桿菌轉化法．
（4）對于目的基因的檢測與鑒定，可以進行分子水平的檢測，三種檢測方法分別有DNA分子雜交、DNA-mRNA雜交、抗原一抗體雜交；若進行個體水平的檢測，需將該植株栽培于干旱、鹽堿和貧瘠環境中，以觀察其生長狀況．
（5）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）題目中說的“克隆”實際上指的是PCR技術，即在分子水平上克隆DNA分子．
（2）基因表達載體的組成包括啟動子、終止子、復制原點、標記基因和目的基因．
（3）將目的基因導入雙子葉植物常用農桿菌轉化法．
（4）對于目的基因的檢測與鑒定，可以進行分子水平的檢測，三種檢測方法分別有DNA分子雜交、DNA-mRNA雜交、抗原一抗體雜交；若進行個體水平的檢測，需將該植株栽培于干旱、鹽堿和貧瘠環境中，以觀察其生長狀況．
（5）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定．
故答案為：
（1）PCR
（2）標記基因和目的基因
（3）農桿菌轉化法
（4）DNA-mRNA雜交      抗原一抗體雜交      干旱、鹽堿和貧瘠
（5）目的基因的獲取   基因表達載體的構建    將目的基因導入受體細胞   目的基因的檢測與鑒定

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確判斷各選項．