Question

【題目】長春花植物中含有復雜的生物堿，其中長春花堿是目前應用最廣泛的天然植物抗腫瘤藥物之一，提取方法如下：長春花干燥粉碎→纖維素酶處理→加入pH為4.0的酸中→恒溫水浴→加堿調pH至8.0→四氯化碳萃取。回答下列問題：

（1）纖維素酶是一類復合酶，包括____________，實驗室常用________________________ 法鑒別微生物是否產生纖維素酶。

（2）長春花干燥粉碎后再用纖維素酶處理的原因是________________________。

（3）長春花堿微溶于水，易溶于酸中，由此推測，后續提取加堿的目的是_______________________。

（4）本實驗中纖維素酶在不同pH和溫度處理后，提取得到的長春花堿含量如圖所示，a、b、c曲線最大值對應的溫度均為50℃，原因是________________________，長春花堿粗品的鑒定方法是____________。

Answer 1

【答案】 C1酶，Cx酶，葡萄糖苷酶 剛果紅染色 增大纖維素與纖維素酶的接觸面積，提髙纖維素的降解率 讓溶解于酸中的長春花堿析出 在不同pH條件下，纖維素酶的最適溫度均為50℃ 紙層析法

【解析】

微生物產生的纖維素酶是一種復合酶，包括Cx酶、C1酶和葡萄糖苷酶，Cx酶作用于無定型的纖維素區域，使纖維素斷裂成片段；C1又叫纖維二糖水解酶，它可以作用于纖維素的結晶區或小片段纖維素，從糖鏈末端開始切掉兩個葡萄糖分子，產生纖維二糖；葡萄糖苷酶則將纖維二糖分解成葡萄糖。剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，而不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。

（1）根據以上分析已知，纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；由于剛果紅可以與纖維素產生紅色絡合物，而水解產物不能，因此實驗室常用剛果紅染色法鑒別微生物是否產生纖維素酶。

（2）長春花干燥粉碎后再用纖維素酶處理，可以增大纖維素與纖維素酶的接觸面積，提髙纖維素的降解率。

（3）長春花堿微溶于水，易溶于酸中，所以實驗步驟中“加堿調pH至8.0”的目的是讓溶解于酸中的長春花堿析出。

（4）在不同pH條件下，纖維素酶的最適溫度均為50℃，所以圖中a、b、c曲線最大值對應的溫度均為50℃；長春花堿粗品的鑒定一般采用紙層析法。