Question

【題目】動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有很多用途，如生產(chǎn)分泌性蛋白藥物、檢測有毒物質(zhì)、獲得大量自身健康細(xì)胞等。某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動物肝細(xì)胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。請根據(jù)下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)回答相關(guān)問題：

（1）在動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是______________。

（2）隨著細(xì)胞分裂增殖次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞停止分裂，極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成特殊細(xì)胞，該種細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為________________________________。

（3）實(shí)驗(yàn)中可以通過觀察細(xì)胞的畸變率來確定物質(zhì)毒性的大小。某有機(jī)物X，其毒性可誘發(fā)染色體斷裂。利用下圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機(jī)物X是否具有解毒作用。

材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細(xì)胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機(jī)物X溶液等。實(shí)驗(yàn)過程如下：

①在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，取4等份，備用。

②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）。

	甲	乙	丙	丁
步驟一：加入肝臟培養(yǎng)液	√	√	√	√
步驟二：加入有機(jī)物X溶液	√		√
步驟三：放置肝臟小塊	√

上表中的步驟還未完成，還需進(jìn)行的操作是_______________________________。

③培養(yǎng)一段時(shí)間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。

④一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片，在顯微鏡下觀察_____________________，并對比分析，最好選用細(xì)胞分裂到________期時(shí)進(jìn)行觀察。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細(xì)胞正常，則說明__________________________________。

Answer 1

【答案】人們對細(xì)胞所需營養(yǎng)物質(zhì)成分不明確，血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì) 變?yōu)榍蛐危��?xì)胞膜表面糖蛋白的量減少 向乙（或丁）組裝置中放置肝臟小塊 染色體形態(tài)和數(shù)量 中 肝臟小塊對有機(jī)物X具有解毒作用

【解析】

1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH。

（1）在動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是人們對細(xì)胞所需營養(yǎng)物質(zhì)成分不明確，血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。

（2）隨著細(xì)胞分裂增殖次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞停止分裂，極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成特殊細(xì)胞，該種細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為變?yōu)榍蛐危��?xì)胞膜表面糖蛋白的量減少。

（3）②為了排除是肝臟培養(yǎng)液或是肝臟小塊對實(shí)驗(yàn)的影響，應(yīng)向乙或丁裝置中放置肝臟小塊。

④有機(jī)物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂，所以一段時(shí)間后要觀察淋巴細(xì)胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否變化；有絲分裂中期染色體的形態(tài)和數(shù)目比較清晰，所以最好選用細(xì)胞分裂的中期時(shí)進(jìn)行觀察；甲組添加肝臟小塊，淋巴細(xì)胞染色體正常，丙組沒有添加，出現(xiàn)染色體異常，說明肝臟小塊對有機(jī)物X具有解毒作用。