Question

【題目】甲、乙兩位同學(xué)從實(shí)際出發(fā)著手準(zhǔn)備如下實(shí)驗(yàn)。甲同學(xué)想從土壤中分離出自生固氮菌（一類能獨(dú)立固定氮?dú)獾募?xì)菌）。查閱資料得知, 細(xì)菌的直徑大小通常在0.5~5μm之間，某針筒式微孔過濾器（濾膜孔徑0.22微米，如圖），耐熱性穩(wěn)定。乙同學(xué)想充分利用當(dāng)?shù)氐奶赜匈Y源——檸檬來提取檸檬精油，查閱資料得知檸檬精油是揮發(fā)性物質(zhì)。回答下列問題：

（1）從甲同學(xué)查閱的資料進(jìn)行思考，如何配制含有不耐高溫藥品A的無菌培養(yǎng)液？________________（在無菌環(huán)境中操作）。

（2）甲同學(xué)進(jìn)行富集培養(yǎng)時(shí)，為達(dá)到篩選自生固氮菌的目的，在配制培養(yǎng)液時(shí)不應(yīng)添加_________營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)時(shí)要將裝有培養(yǎng)液的錐形瓶放置在搖床上，其目的是提高培養(yǎng)液中的_____________，同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)時(shí)，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板。如何判斷所制作的平板沒有被微生物污染？_____________。

（3）乙同學(xué)想通過水中蒸餾法提取檸檬精油，可以嗎？___________________。請(qǐng)你說出理由：________________________。

Answer 1

【答案】 將溶解好的A溶液通過滅菌的針筒式微孔過濾器濾去微生物后，取適量加入到滅菌的培養(yǎng)液中，搖勻即可 含氮物質(zhì)（氮源） 溶解氧 待平板冷凝后，置于恒溫箱中1﹣2天，沒有長(zhǎng)出微生物的是符合無菌要求的平板 不可以 水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，某針筒式微孔過濾器的濾膜孔徑為0.22微米，而題干信息顯示細(xì)菌的直徑大小通常在0.5~5μm之間，因此通過該針筒式微孔過濾器后可以除去細(xì)菌，獲得無菌培養(yǎng)液。

（1）根據(jù)以上分析可知，為了獲得含藥品A的無菌培養(yǎng)液，應(yīng)該通過圖示針筒式微孔過濾器，即將溶解好的A溶液通過滅菌的針筒式微孔過濾器濾去微生物后，取適量加入到滅菌的培養(yǎng)液中，搖勻即可。

（2）自生固氮菌具有固氮能力，其培養(yǎng)基中不需要加入氮源，而其他微生物沒有固氮能力，因此用不含氮元素的培養(yǎng)基可以篩選出自生固氮菌。將裝有培養(yǎng)液的錐形瓶放置在搖床上，可以增加培養(yǎng)液中的溶解氧的含量，促進(jìn)菌種的有氧呼吸，同時(shí)還能夠使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。若要判斷制作的平板是否被微生物污染，應(yīng)該不接種菌種，觀察平板上的微生物菌落情況，即待平板冷凝后，置于恒溫箱中1﹣2天，沒有長(zhǎng)出微生物的是符合無菌要求的平板。

（3）水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題，因此不能通過水中蒸餾法提取檸檬精油。