Question

【題目】a干擾素是由人的白細胞產生的一種蛋白質,是抗病毒的一類特效藥,人類利用基因工程技術已經大批量生產a干擾素。請分析回答下列問題:

(1)利用逆轉錄的方法合成干擾素基因,不能從上皮細胞中提取mRNA,原因是______;這種方法合成的基因與細胞內的基因相比,一般沒有______、啟動子、終止子等結構。

(2)根據α干擾素基因的脫氧核苷酸序列設計并合成引物,利用______技術可得到大量的α干擾素基因。

(3)基因工程中利用的工具酶有______,最常用的載體是______。

(4)將重組DNA導入大腸桿菌細胞時,需用______處理細胞使其成為______細胞。

Answer 1

【答案】上皮細胞中α干擾素基因不轉錄內含子PCR限制酶、DNA連接酶質粒Ca2+感受態

【解析】

基因工程常考的3種基本工具：

(1)限制性核酸內切酶：識別特定核苷酸序列，并在特定位點上切割DNA分子。

(2)DNA連接酶：①E·coliDNA連接酶只能連接黏性末端；②T4DNA連接酶能連接黏性末端和平末端。

(3)運載體：①能在宿主細胞內穩定存在并大量復制；②有一個至多個限制酶切割位點；③具有特殊的標記基因——以便對含目的基因的受體細胞篩選。

（1）α干擾素是由人的白細胞產生的一種蛋白質，上皮細胞不能轉錄α干擾素的基因。用逆轉錄法合成的基因沒有啟動子、終止子、內含子等結構，必須構建基因表達載體后，才能在受體細胞中表達。

（2）要得到大量的α干擾素基因，可利用PCR擴增技術。

（3）基因工程技術需要用到三種工具，DNA連接酶和限制酶是基因工程中利用的工具酶，質粒是最常用的載體。

（4）將目的基因導入微生物細胞常用感受態轉化法，即常用Ca2+處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞，在一定溫度條件下完成轉化。