Question

【題目】圖1表示“華恢1號”抗蟲水稻主要培育流程，據圖1回答：
（1）殺蟲基因通過①～④，最終在宿主細胞內維持穩定和表達的過程叫做 ．
（2）組建理想的載體需要對天然的質粒進行改造．圖2是天然土壤農桿菌Ti質粒結構示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點），據圖2分析： ①人工改造質粒時，要使抗蟲基因能成功表達，還應插入 ．
②人工改造質粒時，用限制酶Ⅰ處理，其目的是：
第一，去除質粒上（基因），保證T﹣DNA進入水稻細胞后不會促進細胞的分裂和生長；
第二，使質粒帶有單一限制酶作用位點，有利于 ．
第三，使質粒大小合適，可以提高轉化效率等．
③若用限制酶Ⅱ分別切割經過②過程改造的理想質粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構成重組Ti質粒．分別以含四環素和卡那霉素的培養基培養已成功導入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的情況是 ．
（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為 ，則該酶識別的核苷酸序列是 ．

Answer 1

【答案】
（1）轉化
（2）啟動子；tms和tmr；目的基因（或外源DNA）準確插入；在含卡那霉素的培養基中能夠生長,而在含四環素的培養基中不能生長
（3）GACGTC
【解析】解：（1）轉化是指目的基因進人受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程，圖中①～④表示該過程．（2）①啟動子是一段特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結合的部位，有了它才能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質．②圖中看出，tms基因能夠編碼生長素，tmr基因能夠編碼細胞分裂素，這兩種激素能夠促進植物的生長．因此人工改造時用限制酶Ⅰ處理，其目的之一是除去或破壞質粒上的tmr、tms，保證T﹣DNA進入水稻細胞后不會引起細胞的無限分裂和生長；另外只有一個插入位點，也有利于目的基因（或外源DNA）準確插入．③若用限制酶Ⅱ切割改造過的理想質粒，質粒上的抗四環素的標記基因（tet）就會破壞，所以以含四環素和卡那霉素的培養基培養后，在含卡那霉素的培養基能夠生長，而在含四環素的培養基中不能生長．（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為 ，則該酶識別的核苷酸序列是GACGTC．

所以答案是：（1）轉化（2）①啟動子②tms和tmr　目的基因（或外源DNA）準確插入③在含卡那霉素的培養基中能夠生長，而在含四環素的培養基中不能生長（3）GACGTC

【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術即可以解答此題．