Question

【題目】有機農藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環境。研究發現，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如下圖甲、乙所示。

（1）微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、 四類，該實驗所用的選擇培養基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是 。

（2）與微生物培養基相比，植物組織培養的培養基常需添加生長素和 ，這些植物激素一般需要事先單獨配置成 保存備用。

（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是 。劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有 ， 。

（4）為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設是 ，該實驗設計是否合理？為什么？ 。

Answer 1

【答案】

（1）氮源和無機鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖

（2）細胞分裂素 母液

（3）接種環 接種環灼燒后未冷卻 劃線未從第一區域末端開始

（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質 不合理 缺少空白對照

【解析】

試題分析：

（1）微生物生長繁殖所需的主要營養物質包括碳源、水、氮源和無機鹽四類；選擇培養基只允許特定種類的微生物生長，又能抑制或阻止其他種類微生物生長，因而必須以苯磺隆為唯一碳源，只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖。

（2）植物組織培養過程中啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵激素是生長素和細胞分裂素；為了避免每次配制時都要稱量，可將植物激素先單獨配制成母液保存備用。

（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環（或接種針）；接種環在平板內的每一次劃線前，都要先灼燒滅菌冷卻后再劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線。第二劃線區域只有第一條線無菌落，而其他的劃線上卻有菌落，很可能是因為接種環在灼燒后末冷卻，第一次劃線時將菌種燙死，而后接種環冷卻，能正常劃線；也可能是第一次劃線時劃線未從第一區域末端開始，使接種環上無菌種。

（4）圖乙實驗為取得菌種培養液過濾后離心上清液中加入蛋白酶溶液，測得其對苯磺隆的降解率。蛋白酶是用于水解上清液中的某蛋白質的，由此可判定實驗假設是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質，若用蛋白酶處理后，可使該蛋白質分解，苯磺隆降解率下降，則假設成立；但是尚需設置不加入蛋白酶的空白對照組實驗，否則沒有說服力，因而不合理。