Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

(1)htPA基因與載體用________切割后，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用____________技術。

(2)為獲取更多的卵(母)細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要經過________，才具備受精能力。

(3)將重組表達載體導入受精卵常用的方法是________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行________。

Answer 1

【答案】 同種限制性核酸內切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交(或核酸探針) 超數排卵 獲能(處理) 顯微注射法 性別鑒定

【解析】試題分析：DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。該基因工程需要對羊的性別進行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進行移植。

（1）htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體；檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術。

（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能（處理），才具備受精能力。

（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是顯微注射法。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進行移植。