Question

【題目】下圖是將乙肝表面抗原基因轉移到煙草細胞內生產乙肝疫苗的示意圖，請據圖回答下列問題。

（1）過程①表示_________。為了使目的基因正常表達，其首端必須有啟動子，它是___________的部位。若限制酶切出了平末端，要選擇___________進行連接。（填“E·coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）

（2）圖中將乙肝表面抗原基因導入煙草細胞的方法稱為____________________。它是利用運載體Ti質粒中含有___________序列，可以將目的基因整合到宿主細胞的染色體上。

（3）圖中將乙肝表面抗原基因導入煙草細胞后，長芽、生根的過程中采用了細胞工程的___________技術，該技術的原理是______________________。

（4）檢測煙草植株細胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是_____________。

Answer 1

【答案】 基因表達載體的構建 RNA聚合酶識別 結合T4DNA連接酶 農桿菌轉化法 T-DNA 植物組織培養 植物細胞具有全能性 抗原一抗體雜交法

【解析】試題分析：圖示中①為基因表達載體的構建，②為目的基因的導入過程，因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（1）據圖示可知，過程①表示基因表達載體的構建，啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，RNA聚合酶與其結合后可以驅動基因的轉錄。為了使目的基因正常表達，其首端必須有RNA聚合酶識別和結合的部位，即啟動子，若限制酶切出了平末端，要選擇T4DNA連接酶進行連接。

（2）將目的基因進入植物細胞常用的方法是農桿菌轉化法，故將乙肝表面抗原基因導入煙草細胞的方法稱為農桿菌轉化法。它是利用運載體Ti質粒中含有T﹣DNA序列，可以將目的基因整合到宿主細胞的染色體上。

（3）圖中將乙肝表面抗原基因導入煙草細胞后，需要采用了細胞工程的植物組織培養技術讓其生根、長芽，該技術的原理是植物細胞具有全能性。

（4）檢測乙肝表面抗原基因是否翻譯出乙肝抗原蛋白，檢測的方法是抗原﹣抗體雜交。